白介素10對(duì)大鼠腦缺血神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制作用及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：探討白介素10(Interlcukin-10，IL-10)對(duì)大鼠腦缺血神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制作用及其分子生物學(xué)機(jī)制，并通過觀察康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)和腦組織中IL-10含量變化的影響，探討IL-10與康復(fù)訓(xùn)練促進(jìn)腦缺血神經(jīng)功能恢復(fù)的關(guān)系。 方法：參照ZeaLonga線栓法制各大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(MiddleCerebralArteryOcclusion，MCAO)局灶性腦缺血模型，并在腦立體定位儀下經(jīng)側(cè)腦室注射IL-

2、10，TUNEL法觀察缺血梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡的變化，免疫組織化學(xué)法和半定量RT-PCR法檢測(cè)凋亡調(diào)節(jié)基因Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3的表達(dá)，探討IL-10對(duì)大鼠缺血梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用及其分子生物學(xué)機(jī)制。對(duì)腦缺血大鼠進(jìn)行平衡、抓握、旋轉(zhuǎn)、行走等康復(fù)訓(xùn)練，于MCAO后3d，7d，14d進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)估，并采用雙抗體夾心ELISA法測(cè)定腦組織中IL-10濃度，探討康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功

3、能恢復(fù)和腦組織中IL-10含量變化的影響。 結(jié)果：腦缺血后凋亡神經(jīng)細(xì)胞(TUNEL陽性細(xì)胞)主要見于梗死灶周圍的紋狀體及額頂皮質(zhì)下腦組織，與Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3陽性細(xì)胞分布相一致。與假手術(shù)組相比，腦缺血組凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目顯著增多，梗死灶周圍腦組織Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白和mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(p＜0.01)，Bcl-2/Bax比值顯著下降(p＜0.01)；與

4、溶劑對(duì)照組相比，經(jīng)側(cè)腦室注射IL-10干預(yù)組凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目顯著減少(p＜0.05)，促凋亡基因Bax、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表達(dá)顯著下調(diào)(p＜0.05orp＜0.01)，抗凋亡基因Bcl-2蛋白和mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(p＜0.05)，Bcl-2/Bax比值顯著增加(p＜0.01)，但是對(duì)Fas的表達(dá)未顯示出作用(p＞0.05)?？祻?fù)訓(xùn)練組大鼠在腦缺血后7d和14d時(shí)神經(jīng)功能評(píng)分顯著優(yōu)于對(duì)照組(p＜0.05orp＜0

5、.01)，腦組織中IL-10濃度較對(duì)照組顯著增高(p＜0.05，p＜0.01)，康復(fù)訓(xùn)練組與對(duì)照組在腦缺血后3d時(shí)神經(jīng)功能評(píng)估及腦組織中IL-10濃度差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。 結(jié)論： 1.腦缺血顯著誘導(dǎo)梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與促凋亡基因Bax、Fas、FasL和Caspase-3表達(dá)上調(diào)，Bel-2/Bax比值下降有關(guān)。 2.IL-10可抑制缺血梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可