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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
缺血性腦卒中動(dòng)物模型的成功構(gòu)建受很多因素影響,梗塞變異系數(shù)(IVC)是評(píng)價(jià)缺血性腦卒中動(dòng)物模型效果的重要指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型腦梗塞病灶的范圍過(guò)大或過(guò)小,可影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦梗塞變異系數(shù)及死亡率。建立缺血性腦卒中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型關(guān)鍵就是要降低梗塞變異系數(shù)及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡率。我們用阻斷3根血管的方法(3-VO),以期建立能夠降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦梗塞變異系數(shù)及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡率的缺血性腦卒中動(dòng)物模型,并期望產(chǎn)生可靠的臨床前證據(jù),以便對(duì)缺血性腦卒中
2、的各種干預(yù)措施進(jìn)行評(píng)估。苯甲酸阿格列汀(AGL)是一種高選擇性的二肽基肽酶4(DPP-4)抑制劑,用于2型糖尿病的治療,具有心血管保護(hù)作用。我們應(yīng)用C57BL/6J小鼠建立3-VO的缺血性腦卒中模型,觀察阿格列汀對(duì)小鼠缺血性腦卒中的影響,觀察阿格列汀是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
方法:
我們使用C57BL/6J雄性小鼠,采取一種新式手術(shù)入路,經(jīng)顳肌筋膜入路顯露顴弓,切開(kāi)顳肌筋膜,向背側(cè)一起牽拉面神經(jīng)及靜脈。去除顴弓并鉆骨孔
3、開(kāi)骨窗,雙極電凝永久性阻斷大腦中動(dòng)脈,同時(shí)行雙側(cè)頸總動(dòng)脈臨時(shí)阻斷,3-VO總時(shí)間為15分鐘,來(lái)構(gòu)建小鼠缺血性腦卒中模型。在隨后的實(shí)驗(yàn)中,我們使用C57BL/6J雄性小鼠,預(yù)防性給予阿格列汀后對(duì)小鼠行3-VO手術(shù),術(shù)后觀察急性期及慢性期腦梗死體積及神經(jīng)功能缺損評(píng)分。預(yù)防性給予阿格列汀后,觀察小鼠局部腦血流量(rCBF)的變化并進(jìn)行腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)水平測(cè)定。小鼠3-VO術(shù)后給予阿格列汀治療,觀察小鼠急性期、慢性期腦梗死體積及神
4、經(jīng)功能缺損評(píng)分。
結(jié)果:
我們成功建立了小鼠3-VO的缺血性腦卒中模型,這種動(dòng)物模型采取的手術(shù)入路可以避免顴弓周?chē)o脈的外傷性出血。通過(guò)此動(dòng)物模型我們可以在小鼠大腦皮層形成可靠的、可重復(fù)的缺血半暗帶(IP)。此局灶性腦卒中動(dòng)物模型可使缺血半暗帶區(qū)的rCBF持續(xù)連貫的減少。本動(dòng)物模型可降低梗塞變異系數(shù),大大降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡率,適于評(píng)估神經(jīng)保護(hù)藥物在缺血性腦卒中當(dāng)中的保護(hù)作用。生理鹽水對(duì)照組與3個(gè)隊(duì)列研究中不同劑量阿格列
5、汀溶液組的小鼠的體溫、心率、平均動(dòng)脈壓、體重、血糖無(wú)顯著性差異。阿格列汀對(duì)小鼠缺血性腦卒中具有保護(hù)作用。
結(jié)論:
我們采取3-VO的方式,構(gòu)建的新型的缺血性腦卒中動(dòng)物模型,具有更短的手術(shù)操作時(shí)間,更低的腦梗塞變異系數(shù)值,腦梗塞后死亡率更低。本課題組的3-VO缺血性腦卒中模型可以產(chǎn)生連貫的,大小一致的缺血半暗帶。我們可使用本動(dòng)物模型來(lái)探索缺血性腦卒中的治療與保護(hù)。長(zhǎng)期預(yù)防性給小鼠服用阿格列汀可升高腦中BDNF的水平,并
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