急性肺栓塞大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的變化.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)采用自體血栓回輸法建立急性肺栓塞(acutepulmonaryembolismAPE)大鼠模型,固相夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血漿中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)含量,免疫組化法觀察HGF在肺組織中的表達(dá)水平,通過檢測(cè)肺栓塞后血漿HGF含量及肺組織中HGF的表達(dá)水平,觀察HGF變化趨勢(shì),研究HGF對(duì)于肺栓塞的診斷價(jià)值,并初步探討HGF在肺栓塞時(shí)升高的機(jī)制。
　　方法：3

2、2只健康成年SD大鼠(雌雄不限)隨機(jī)分為2組:血漿HGF檢測(cè)組(16只)和組織HGF檢測(cè)組(16只)。每組又可分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各8只大鼠。實(shí)驗(yàn)組即模型組,采用自體血栓回輸法建立肺栓塞模型,在無菌條件下斷尾取血1mL,置于無菌導(dǎo)管中,室溫下靜置25~30min,70℃水浴10min,形成牢固血栓。在超聲下將4F鞘管擴(kuò)張管插入右心房或接近右心房的下腔靜脈處,將預(yù)制栓子通過鞘管擴(kuò)張管分次注入,直至大鼠出現(xiàn)呼吸淺快、躁動(dòng)不安、喘憋、口唇及耳朵

3、發(fā)紺等缺氧癥狀,心率較術(shù)前增加30次/min左右,提示造模成功,停止繼續(xù)注入。對(duì)照組即假手術(shù)組,以與自體血栓等量生理鹽水注入。血漿HGF檢測(cè)組,在造模成功后0、1、6、12、24、48小時(shí),六個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集血樣,ELISA法檢測(cè)血漿HGF含量,并觀察HGF的變化趨勢(shì);組織HGF檢測(cè)組,在造模成功后12h處死大鼠,取肺、肝和腸組織,10％福爾馬林固定,石蠟包埋后,行HE染色,鏡下尋找栓子,驗(yàn)證造模成功,并用免疫組化法檢測(cè)HGF蛋白在肺組織中

4、的表達(dá),同時(shí)觀察肝和腸組織有無血栓。
　　結(jié)果：血漿實(shí)驗(yàn)組和組織實(shí)驗(yàn)組分別有1只和2只大鼠死亡,其他實(shí)驗(yàn)組大鼠肺動(dòng)脈可見栓子,肝、腸組織未發(fā)現(xiàn)梗死現(xiàn)象,顯示造模成功。實(shí)驗(yàn)組血漿HGF在造模后1h開始升高,12h達(dá)到高峰,48h后下降至接近正常,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,造模1、6、12和24h血漿HGF差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);急性肺栓塞肺組織中HGF蛋白表達(dá)以陽性面積率表示,組織對(duì)照組為(0.88±0.26)×10-2,組織實(shí)