氯丙咪嗪對(duì)大鼠睡眠-覺(jué)醒周期和增食素系統(tǒng)mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、引言：盡管失眠是抑郁癥(depression)患者的最主要癥狀之一，但是睡眠剝奪(sleepdeprivation)，特別是快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠(rapideyemovementsleep，REMsleep)的剝奪對(duì)抑郁癥的治療作用卻是不爭(zhēng)的事實(shí)。其中的機(jī)制仍然不甚明了。最新資料提示，運(yùn)動(dòng)覺(jué)醒(activewake)調(diào)節(jié)缺陷以及由此可能產(chǎn)生的代償性安靜覺(jué)醒(quietwake)增加在抑郁癥的發(fā)病中可能起著重要作用。增食素能(orexiner

2、gic)神經(jīng)元是最近幾年新發(fā)現(xiàn)的促進(jìn)覺(jué)醒的神經(jīng)元。該神經(jīng)元通過(guò)合成、釋放增食素A增加安靜覺(jué)醒，通過(guò)釋放增食素B增加運(yùn)動(dòng)覺(jué)醒。馮平福在2003年發(fā)現(xiàn)幼年使用氯丙咪嗪(clomipramine)處理的抑郁癥大鼠模型的多個(gè)腦區(qū)增食素B明顯降低。這些事實(shí)提示，抗抑郁治療很有可能影響增食素的分泌并產(chǎn)生對(duì)覺(jué)醒與睡眠的調(diào)節(jié)。目前對(duì)這一問(wèn)題未見(jiàn)更多的報(bào)道。氯丙咪嗪是一種經(jīng)典的三環(huán)類(lèi)抗抑郁藥，并有很強(qiáng)的抑制快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠(REMsleep)的作用。根據(jù)

3、睡眠/覺(jué)醒的基本構(gòu)成原理，氯丙咪嗪在抑制快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠的同時(shí)，應(yīng)該具有延長(zhǎng)覺(jué)醒或者慢波睡眠(slowwavesleep，SWS)的作用。據(jù)此，我們認(rèn)為，氯丙咪嗪可能通過(guò)影響增食素B的分泌而影響運(yùn)動(dòng)覺(jué)醒。 目的：通過(guò)睡眠描記的方法，觀察成年大鼠在注射氯丙咪嗪后，其睡眠/覺(jué)醒周期是否發(fā)生了變化；并且通過(guò)半定量RT-PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在額葉皮層，海馬和下丘腦增食素前體(prepro-orexin)，增食素1，2受體(OX1R，

4、OX2R)mRNA水平是否不同。 方法：選用成年雄性SD大鼠16只，體重210～250g，分為生理鹽水對(duì)照組和氯丙咪嗪注射組，每組8只。為進(jìn)行長(zhǎng)期睡眠描記，給大鼠進(jìn)行腦電電極和肌電電極植入術(shù)，術(shù)后恢復(fù)5天。然后進(jìn)行48小時(shí)睡眠描記，腦電圖(electroencephalogram，EEG)和肌電圖(electromyogram，EMG)經(jīng)過(guò)數(shù)/模轉(zhuǎn)換后輸入計(jì)算機(jī)，在描記第24、36和48小時(shí)分別給與皮下注射生理鹽水或氯丙咪嗪。結(jié)

5、束描記后兩小時(shí)，斷頭處死全部大鼠，取額葉皮層、海馬和下丘腦組織保存于液氮中，然后實(shí)行半定量RT-PCR。 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。睡眠/覺(jué)醒狀態(tài)數(shù)據(jù)的比較用單因素方差分析(onewayANOVA)，mRNA半定量分析數(shù)據(jù)用t檢驗(yàn)處理。以P≤0.05為差異有顯著性標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：1.氯丙咪嗪顯著地減少了大鼠的運(yùn)動(dòng)覺(jué)醒時(shí)間和其在總覺(jué)醒中的比例(P＜0.01)；增加了大鼠安靜覺(jué)醒的時(shí)間和其在覺(jué)醒中的比例(

6、P＜0.01)。2.氯丙咪嗪對(duì)大鼠覺(jué)醒和總睡眠的時(shí)間沒(méi)有影響(P＞0.05)。3.氯丙咪嗪顯著減少了快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠的時(shí)間和其在總睡眠中的比例(P＜0.01)，也顯著延長(zhǎng)了大鼠的快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠潛伏期(P＜0.01)，但是沒(méi)有改變大鼠慢波睡眠的時(shí)間和其在總睡眠中的比例(P＞0.05)。4.氯丙咪嗪顯著地抑制了額葉皮層、海馬和下丘腦增食素前體mRNA的表達(dá)(P＜0.01)，同時(shí)顯著抑制了額葉皮層、海馬和下丘腦增食素2受體mRNA的表達(dá)(P