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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.在一定參數(shù)的電針刺激不同穴位組合情況下,分析功能性便秘大鼠模型中血清及胃腸組織中生長(zhǎng)抑素(SS)的動(dòng)態(tài)變化。
2.通過(guò)比較不同針刺組中指標(biāo)生長(zhǎng)抑素(SS)的變化,選擇出治療功能性便秘的最優(yōu)穴位組合,從而運(yùn)用于功能性便秘的臨床治療
方法:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:SPF級(jí)SD大鼠60只,平均體質(zhì)量(200±10)g,雌雄各半。購(gòu)于西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。將大鼠單只飼養(yǎng)于單籠中,籠下墊濾紙,相同的
2、生存環(huán)境,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,大鼠一般情況正常,開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分組。
2.功能性便秘造模方法:將 SD大鼠單只單籠關(guān)起,籠下墊濾紙,正常飼養(yǎng)一周后,每日采用0-4℃生理鹽水給予3ml/只進(jìn)行灌胃。每天1次,連續(xù)造模14天。為消除生物節(jié)律的影響,每天同一時(shí)間進(jìn)行束縛應(yīng)激。停止灌胃后,各組繼續(xù)正常飼食、飲水,觀察14天。造模和觀察共用28天。
3.分組方法與標(biāo)本采集:(按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)原則分組)60只大鼠適應(yīng)性喂
3、養(yǎng)7d后,隨機(jī)分為6組:空白組一組,溫水對(duì)照組1組、觀察組4組,每組10只。對(duì)照組以22~26℃0.9%NaCI溶液灌胃;其余4組以0-4℃生理鹽水給予3ml/只進(jìn)行灌胃。(動(dòng)物灌胃劑量按人的等效量換算)。
溫水灌胃對(duì)照組大鼠于28d末,觀察組各組大鼠分別于28d末,對(duì)相應(yīng)組進(jìn)行針灸治療10天,每天一次,針灸治療結(jié)束后采血及截取相應(yīng)胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸組織,用于檢測(cè)腦腸肽SS的水平。
4.電針對(duì)大鼠功能性便
4、秘調(diào)節(jié)作用機(jī)制的研究
功能性便秘組大鼠:60只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后,隨機(jī)分為6組:空白組,溫水對(duì)照組、模型組、單元取穴組(雙側(cè)天樞、大腸俞)、集元取穴組(雙側(cè)曲池、上巨虛)、單元加集元取穴組(單側(cè)天樞、大腸俞、曲池、上巨虛),每組10只(上巨虛位于大鼠后肢足三里向下約5mm處,曲池在大鼠橈骨近端的關(guān)節(jié)外側(cè)前方的凹陷中,大腸俞位于第4腰椎棘突下,旁開(kāi)5mm,天樞穴位于臍中旁開(kāi)5mm,以上各穴均直刺5mm)。采用韓式電針儀(LH2
5、02H型)治療,選擇疏密波,頻率為疏波2Hz,密波15Hz,電流強(qiáng)度為1.5mA,以引起大鼠肢體輕微抖動(dòng)為度,留針20分鐘,溫水灌胃組和模型對(duì)照組不做電針處理,1次/日,10次為一療程,1個(gè)療程后評(píng)定療效。電針治療10日后,處死,取標(biāo)本,采集所需標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。
5.觀察及檢測(cè)方法
大鼠一般狀態(tài):大鼠精神狀態(tài)、皮毛、食量、活動(dòng)度,體質(zhì)量增長(zhǎng)率,糞便性狀,首次黑便排出時(shí)間,大鼠24小時(shí)糞便粒數(shù)和質(zhì)量,大鼠糞便含水量等。<
6、br> 6.實(shí)驗(yàn)技術(shù)及檢測(cè)方法
采用ELISA法檢測(cè)大鼠血清及組織中SS水平
結(jié)果:在一定參數(shù)的電針刺激不同穴位組合情況下,功能性便秘大鼠模型中血清及胃腸組織中生長(zhǎng)抑素(SS)發(fā)生動(dòng)態(tài)變化,通過(guò)比較不同針刺組中指標(biāo)生長(zhǎng)抑素(SS)的變化,集元組生長(zhǎng)抑素(SS)含量降低最明顯
結(jié)論:
?。?)明確電針不同穴位對(duì)功能性便秘大鼠中腦腸肽 SS調(diào)控作用的特異性穴位組。從分子水平闡明電針調(diào)節(jié)功能性便秘的作用
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