2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩53頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、上皮性卵巢癌(epithelialovariancancer,EOC)在婦科惡性腫瘤中死亡率居于首位,由于缺乏早期診斷方法和預(yù)防篩查措施,約75%的患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬于晚期。目前卵巢癌的治療采用手術(shù)聯(lián)合化療的綜合治療手段,盡管治療手段的進(jìn)步使卵巢癌患者的治療取得了成效,但仍有60-80%的患者死于該病,最主要的原因就是術(shù)后高復(fù)發(fā)率及化療耐藥,因此,迫切需要一種新的治療手段用于卵巢癌的臨床治療。
   表皮生長(zhǎng)因子受體(Epiderm

2、algrowthfactorreceptor,EGFR)信號(hào)通路引起了學(xué)者們的廣泛關(guān)注。有證據(jù)顯示,許多腫瘤中存在EGFR的過(guò)表達(dá)和異?;罨?,其中包括卵巢癌[1-2],EGFR活化后通過(guò)激活PI3K/Akt及Ras/Raf/MEK/ERK等在內(nèi)的下游信號(hào)通路參與腫瘤的增殖、凋亡、血管生成、粘附、侵襲、轉(zhuǎn)移等過(guò)程[3],另外,研究表明EGFR信號(hào)通路可能介導(dǎo)化療耐藥的形成。吉非替尼(Iressa)是一種EGFR小分子酪氨酸激酶抑制劑,通過(guò)

3、與ATP競(jìng)爭(zhēng)受體胞內(nèi)區(qū)結(jié)合位點(diǎn)抑制EGFR的自身磷酸化過(guò)程。已有報(bào)道應(yīng)用吉非替尼阻斷EGFR信號(hào)通路的活化,可以增加化療藥物的敏感性。因此將EGFR信號(hào)通路作為藥物作用靶點(diǎn)為逆轉(zhuǎn)卵巢癌耐藥提供了可能。
   目的:通過(guò)抑制EGFR信號(hào)通路的活化,觀察其對(duì)順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞株SKOV3/DDP增殖、凋亡的影響,及逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥的效果,初步探討EGFR信號(hào)通路的活化與順鉑耐藥的關(guān)系。
   方法:
   1、Weste

4、rnblot檢測(cè)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞中EGFR、p-EGFR(活化的EGFR)蛋白的基礎(chǔ)表達(dá)狀態(tài)。
   2、Westernblot檢測(cè)順鉑對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞中EGFR、p-EGFR蛋白表達(dá)的影響。
   3、MTT法檢測(cè)不同濃度的順鉑(0.625、1.25、2.5、5、10、20μg/ml)對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的影響,獲得半數(shù)抑制濃度(IC50),并計(jì)算耐藥指數(shù)。

5、r>   4、MTT法檢測(cè)不同濃度的吉非替尼(0.01、0.1、1、10、100μM)對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的影響。
   5、MTT法檢測(cè)1μM吉非替尼聯(lián)合不同濃度的順鉑(0.625、1.25、2.5、5、10、20μg/ml)對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的影響,獲得聯(lián)用后順鉑的IC50,并計(jì)算耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)。
   6、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)吉非替尼、順鉑、吉非替尼聯(lián)合順鉑對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響。
 

6、  7、Westernblot檢測(cè)吉非替尼、順鉑、吉非替尼聯(lián)合順鉑對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞EGFR、p-EGFR及下游信號(hào)通路Akt、p-Akt(活化的Akt)、ERK、p-ERK(活化的ERK)蛋白表達(dá)的影響。
   8、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,方差齊性檢驗(yàn),三組以上采用方差分析,組間差異采用LSD法,兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn),以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),當(dāng)P<0.05時(shí)

7、,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;當(dāng)P>0.05時(shí),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
   結(jié)果:
   1、Westernblot檢測(cè)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞的EGFR、p-EGFR蛋白表達(dá)結(jié)果:
   SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞中均存在EGFR及p-EGFR蛋白的表達(dá),EGFR蛋白在親本株與耐藥株的表達(dá)量無(wú)顯著差別(P>0.05),SKOV3/DDP細(xì)胞中p-EGFR蛋白的表達(dá)顯著高于SKOV3細(xì)胞的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義(P<0.05)。
   2、Westernblot檢測(cè)順鉑對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞的EGFR、p-EGFR蛋白表達(dá)結(jié)果:
   順鉑處理前后,SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞中EGFR蛋白的表達(dá)量無(wú)顯著差別(P>0.05),順鉑處理后的SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞中p-EGFR蛋白的表達(dá)量相比于順鉑未處理組的細(xì)胞明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
   3、MTT法檢測(cè)順鉑對(duì)S

9、KOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞增殖影響的結(jié)果:
   順鉑對(duì)SKOV3細(xì)胞的IC50為3.74±0.03,SKOV3/DDP細(xì)胞的IC50為17.66±0.58,耐藥指數(shù)為4.72。
   4、MTT法檢測(cè)吉非替尼對(duì)SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞增殖影響的結(jié)果:
   吉非替尼可以抑制SKOV3及SKOV3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng),這種抑制作用呈劑量依賴性,當(dāng)濃度為1μM時(shí),抑制作用明顯增加。同一濃度下吉非替尼對(duì)

10、SKOV3細(xì)胞的抑制率高于SKOV3/DDP細(xì)胞的抑制率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
   5、MTT法檢測(cè)吉非替尼聯(lián)合順鉑對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞增殖影響的結(jié)果:
   與單獨(dú)應(yīng)用順鉑相比,1μM的吉非替尼聯(lián)合順鉑可增加對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞的抑制作用,聯(lián)合作用后順鉑的IC50為7.42±0.15,逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)為2.38。
   6、流式結(jié)果:
   在SKOV3/DDP細(xì)胞中,吉非替尼、順鉑

11、、吉非替尼+順鉑的凋亡率分別為(7.52±0.63)%、(8.13±0.91)%、(17.33±0.84)%,均高于對(duì)照組(未加藥物處理組)的凋亡率(0.28±0.12)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且聯(lián)合組的凋亡率均高于單一用藥組(P<0.05),但仍低于順鉑作用于SKOV3細(xì)胞誘導(dǎo)的凋亡率(23.03±1.23)%(P<0.05)。
   7、Westernblot檢測(cè)不同處理組對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞EGFR、p-

12、EGFR、Akt、p-Akt、ERK、p-ERK蛋白表達(dá)的影響結(jié)果:
   與對(duì)照組相比,順鉑、吉非替尼,順鉑聯(lián)合吉非替尼處理SKOV3/DDP細(xì)胞,EGFR、Akt及ERK蛋白表達(dá)量無(wú)顯著差別(P>0.05)。順鉑處理后,p-EGFR及p-Akt、p-ERK蛋白的表達(dá)量增加,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。吉非替尼處理后,EGFR及Akt、ERK的活性降低,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。吉非替尼與

13、順鉑聯(lián)合處理后,p-EGFR及p-Akt、p-ERK蛋白的表達(dá)量顯著減少,與單用順鉑組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
   結(jié)論:
   1、SKOV3/DDP細(xì)胞中p-EGFR蛋白的表達(dá)量顯著高于SKOV3細(xì)胞中的表達(dá),提示EGFR信號(hào)通路的異?;罨赡軈⑴c了卵巢癌化療耐藥的過(guò)程。
   2、順鉑可以誘導(dǎo)EGFR信號(hào)通路的活化,降低順鉑對(duì)卵巢癌的細(xì)胞毒作用,應(yīng)用EGFR酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼可以協(xié)同順

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論