纖維來(lái)源和細(xì)胞壁降解酶對(duì)豬腸道微生物多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響.pdf

1、本試驗(yàn)旨在通過(guò)不同16S rRNA檢測(cè)技術(shù)探討纖維來(lái)源和細(xì)胞壁降解酶（植酸酶、纖維素酶和木聚糖酶的混合酶制劑）對(duì)豬回腸食糜和糞便中微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。試驗(yàn)選用8頭平均體重為30.1±1.5 kg的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交生長(zhǎng)豬，統(tǒng)一安裝回腸末端T型瘺管，隨機(jī)分為4組，每組兩個(gè)重復(fù)。研究主要包括兩批試驗(yàn)，第一批試驗(yàn)日糧為麥麩日糧(WB)、麥麩加酶日糧、大豆皮日糧(SH)和大豆皮加酶日糧，第二批試驗(yàn)日糧為西蘭花日糧(BR

2、)、西蘭花加酶日糧、米糠日糧(RB)和米糠加酶日糧。每千克試驗(yàn)日糧中混合酶制劑的添加水平為:纖維素酶1000 U、木聚糖酶5000 U和植酸酶1500U。每批試驗(yàn)分4期完成，每期每組試驗(yàn)豬按4×4拉丁方設(shè)計(jì)安排飼喂1種試驗(yàn)日糧，每期試驗(yàn)預(yù)試期為15天，正式期為6天，分別采集飼料、回腸末端食糜和糞便樣品并進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定，主要研究結(jié)果如下:
　　試驗(yàn)一:小麥麩和大豆皮日糧及添加細(xì)胞壁降解酶對(duì)豬腸道微生物多樣性和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影

3、響
　　本試驗(yàn)旨在利用Illumina MiSeq高通量測(cè)序技術(shù)研究以小麥麩或大豆皮為單一纖維來(lái)源的日糧，以及添加細(xì)胞壁降解酶對(duì)豬回腸食糜和糞便微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。結(jié)果表明，兩日糧組豬腸道微生物菌群的多樣性無(wú)顯著差異，但添加酶制劑顯著提高各組豬回腸食糜微生物的多樣性(P＜0.01)，糞便微生物的多樣性也有上升趨勢(shì)(P＜0.10)。小麥麩日糧組豬腸道微生物菌群中Lactobacillus、Veillonella

4、和Ruminococcaceae等的豐度顯著高于(P＜0.05)大豆皮日糧組，而菌群中Streptococcaceae、Peptostreptococcaceae、Lachnospiraceae、Treponema和Methanobrevibacter等的豐度則顯著低于(P＜0.05)后者。添加細(xì)胞壁降解酶可選擇性地改變各日糧組豬腸道內(nèi)Streptococcus、Enterococcus、Veillonella和Treponema等微生

5、物的豐度。大豆皮日糧組豬回腸食糜和糞便中乙酸、丙酸和總揮發(fā)性脂肪酸的濃度均顯著高于(P＜0.01)小麥麩日糧組。除去糞便中乙酸的濃度外，添加酶制劑提高回腸食糜和糞便中上述各類(lèi)揮發(fā)性脂肪酸的濃度(P＜0.01)。
　　試驗(yàn)二:西蘭花莖葉粉和米糠日糧及添加細(xì)胞壁降解酶對(duì)豬腸道微生物多樣性和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響
　　本試驗(yàn)旨在利用Illumina MiSeq高通量測(cè)序技術(shù)研究以西蘭花莖葉粉或米糠為單一纖維來(lái)源的日糧，以及添加細(xì)胞

6、壁降解酶對(duì)豬回腸食糜和糞便微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。結(jié)果表明，西蘭花日糧組豬回腸食糜微生物菌群的多樣性顯著高于米糠日糧組(P＜0.05)，且加酶后兩日糧組豬菌群的多樣性均顯著提高(P＜0.05)。西蘭花日糧組豬腸道內(nèi)纖維素降解菌Ruminococcus和Bacteroides、果膠降解菌Lachnospira和Peptostreptococcus等的豐度顯著高于(P＜0.05)米糠日糧組，而淀粉降解菌Lactobacil

7、lus以及阿拉伯木聚糖降解菌Eubacterium的豐度則顯著低于(P＜0.05)后者。添加酶制劑顯著影響降解淀粉的相關(guān)菌屬Lactobacillus、Veillonella和Megasphaera、果膠降解菌Lachnospira和Prevotella、木聚糖降解菌Eubacterium和纖維素降解茵Ruminococcus等的豐度。西蘭花日糧組豬糞便中總揮發(fā)性脂肪酸的濃度顯著高于米糠日糧組(P＜0.05)，且添加酶制劑顯著提高(P＜

8、0.05)各日糧組豬腸道內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的濃度。
　　試驗(yàn)三:高通量測(cè)序和T-RFLP法用于分析豬腸道微生物菌群多樣性的結(jié)果比較
　　本試驗(yàn)采用試驗(yàn)二獲得的回腸食糜和糞便樣品同時(shí)利用末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(terminal restriction fragment length polymorphism，T-RFLP)和Illumina MiSeq高通量測(cè)序兩種分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，比較兩種方法所得豬腸道微生物菌群多樣性、