水飛薊賓對(duì)高脂誘導(dǎo)大鼠非酒精性脂肪肝胰島素抵抗和脂聯(lián)素的影響.pdf

1、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一種肝組織學(xué)改變與酒精性肝病(alcotlolic liver disease，ALD)相類似，但無過量飲酒史的臨床病理綜合征。近年來，NAFLD的發(fā)病率不斷增高，歐美及日本普通成人NAFLD的患病率為10％～30％，而肥胖者則高達(dá)57％～74％。NAFLD現(xiàn)已替代慢性病毒性肝炎和酒精性脂肪性肝病(ALD)成為歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家的第一大肝病，

2、在我國(guó)也呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，是健康體檢人群肝酶學(xué)異常的常見原因。更嚴(yán)重的是其預(yù)后不容樂觀，28％的患者發(fā)生肝硬化，其中半數(shù)患者因門脈高壓而需肝移植，因此積極治療NAFLD將有深刻的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義，亦是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。 水飛薊治療肝病已有數(shù)千年歷史，經(jīng)過多年的臨床檢驗(yàn)，已證明該藥確切的治療肝病的療效和極低的毒性。有研究顯示其可能具有增強(qiáng)胰島素敏感性、增強(qiáng)抗氧化酶類活性、改善IR的作用。脂聯(lián)素為在正常條件下，僅在脂肪組織中表達(dá)，但是有研

3、究顯示在四氯化碳及IL-6治療后的肝細(xì)胞內(nèi)也有表達(dá)。同時(shí)，有研究提示，脂聯(lián)素與胰島素抵抗有關(guān)。但是，其與NAFLD的關(guān)系還不明確，為了探討水飛薊賓是否除在對(duì)肝細(xì)胞具有減輕細(xì)胞炎癥、抗自由基活性、抗脂質(zhì)過氧化等公認(rèn)的作用之外，存在改善IR的作用；以及探討非酒精性脂肪肝的發(fā)生是否與脂聯(lián)素相關(guān)，我們將從以下兩部分的研究證明： 第一部分水飛薊賓對(duì)高脂誘導(dǎo)大鼠非酒精性脂肪肝胰島素抵抗的影響目的：采用水飛薊賓對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝模型

4、大鼠進(jìn)行干預(yù)性治療，觀察水飛薊賓對(duì)NAFLD大鼠胰島素抵抗的影響。 方法：40只大鼠隨機(jī)分為4組，即模型組(高脂飲食+蒸餾水灌胃)，空白對(duì)照組(正常飼料+蒸餾水灌胃)，羅格列酮組(高脂飲食+羅格列酮3mg/kg·d灌胃)和水飛薊賓組(高脂飲食+水飛薊賓50mg/kg·d灌胃)。觀察各組血脂、肝功、胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)的變化，觀察各組肝組織HE與脂肪特異性的蘇丹Ⅲ染色。 結(jié)果：模型組與空白對(duì)照組相比，TG(1.

5、51±0_37 vs 0.98±0.51，p<0.01)，TCh(2.74±0.65 Vs1.71±0.37，p<0.05)，ALT(450.20±244.12 vs264.56±48.44，p<0.01)，AST(460.30±310.13 vs 196.11±52.23，p<0.01)and HOMA-IR(3.46±1.16 vs 1.07±0.26p<0.01)均得到明顯改善。羅格列酮和水飛薊賓治療可使TG，ALT，AST以及H

6、OMR-IR得到明顯改善(p<0.05)。從組織病理學(xué)亦可得到證實(shí)。 結(jié)論：高脂飲食可誘導(dǎo)大鼠NAFLD和IR發(fā)生，并使肝功、血脂異常升高。水飛薊賓和羅格列酮可以改善高脂飲食大鼠的脂肪肝及IR情況。 第二部分高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝大鼠肝臟脂聯(lián)素的表達(dá)及藥物干預(yù)。目的：采用高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝模型大鼠，觀察肝臟內(nèi)脂聯(lián)素基因和蛋白的表達(dá)情況，同時(shí)采用水飛薊賓和羅格列酮進(jìn)行干預(yù)性治療，觀察兩種藥物對(duì)高脂誘導(dǎo)大鼠NAF

7、LD肝臟脂聯(lián)素的影響。 方法：40只大鼠隨機(jī)分為4組，即模型組(高脂飲食+蒸餾水灌胃)，空白對(duì)照組(正常飼料+蒸餾水灌胃)，羅格列酮組(高脂飲食+羅格列酮3mg/kg·d灌胃)和水飛薊賓組(高脂飲食+水飛薊賓50mg/kg·d灌胃)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法觀察各組肝組織內(nèi)脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)情況，并用相對(duì)定量法計(jì)算。采用蛋白印跡法檢測(cè)各組肝組織內(nèi)脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果：肝組織實(shí)時(shí)熒光定量PCR及免疫印跡顯示模型組

8、的脂聯(lián)素mRNA和蛋白表達(dá)均明顯低于空白對(duì)照組，實(shí)時(shí)熒光定量PCR顯示，模型組與空白對(duì)照組的相對(duì)比值為215.95±135.87 vs 666.12±273.45，而經(jīng)過水飛薊賓和羅格列酮干預(yù)后，脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)增多，分別為453.34±261.79和552.40±268.13。蛋白印跡結(jié)果相類似。 結(jié)論：高脂誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝大鼠肝內(nèi)脂聯(lián)素的表達(dá)明顯下降，水飛薊賓和羅格列酮均可促使肝內(nèi)脂聯(lián)素表達(dá)增多，特別是羅格列酮，可能