姜黃素通過激活PPARγ和抑制BACE1減少神經細胞內β樣淀粉蛋白的產生.pdf

1、目的：本課題旨在研究姜黃素處理體外培養(yǎng)的神經元后BACE1、PPARγ及Aβ40/42的變化，探討其抑制β樣淀粉蛋白作用的可能機制，為AD治療提供新的思路。 方法：通過LipofectaminTM2000將質粒APPswe與BACE1-mychis瞬時共轉染入SH-SY5Y細胞。（1）用姜黃素分濃度組與時間組處理細胞，通過RT-PCR測定BACE1及PPARγ的mRNA水平。通過WesternBlotting檢測BACE1及PP

2、ARγ的蛋白表達。通過ELISA檢測γ-分泌酶的主要水解產物Ap40/42的水平變化。（2）PPARγ抑制劑GW9662預處理細胞阻斷PPARγ活化，WesternBlotting檢測PPARγ及BACE1在對照組（DMSO+姜黃素）和抑制組（GW9662+姜黃素）的蛋白表達。RT-PCR檢測PPARγ及BACE1在對照組和抑制組的mRNA水平。 結果：RT-PCR及WesternBlotting結果顯示轉染細胞經姜黃素處理后B

3、ACE1的mRNA及蛋白表達水平顯著減少，呈濃度和時間依賴性（P<0.05）；而經姜黃素處理后PPARγ的mRNA及蛋白表達水平增加，也呈濃度和時間依賴性（P<0.05）。ELISA結果顯示Ap40/42的產生隨處理濃度及時間的增加顯著降低（P<0.05）。PPARγ抑制劑GW9662預處理細胞后，RT-PCR及WesternBlotting結果顯示抑制組BACE1的mRNA及蛋白表達水平較對照組增加（P<0.05）；而PPARγ的mR