龍葵提取物澳洲茄堿對(duì)肺癌細(xì)胞的抑制作用研究.pdf

1、龍葵分布廣泛,是藥食兩用植物。他營(yíng)養(yǎng)成分高,可食用;也有較好的藥用價(jià)值,是一種常用于治療腫瘤的中藥;龍葵還具有分布廣泛、炮制工藝簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜、使用方便等優(yōu)點(diǎn)。龍葵全草均可入藥,其生物活性成分主要包括甾體類(lèi)生物堿、多糖、維生素A和維生素C等;其中,甾體類(lèi)生物堿中澳洲茄堿(Solasonine)和澳洲茄邊堿(Solamargine)是龍葵的主要活性成分,它們水解后苷元是澳洲茄胺(Solasodine),具有抗腫瘤活性,因此龍葵被列為十大抗

2、腫瘤中草藥之一,是一種具有良好藥用前景的治療腫瘤天然藥物。
　　人肺腺癌細(xì)胞A549和小鼠Lewis肺癌細(xì)胞(Lewis Lung Carcinomas,llc)作為肺癌的細(xì)胞模型在肺毒理學(xué)的體外研究和抗癌作用的研究中得到廣泛使用,已成為抗肺癌研究的重點(diǎn)領(lǐng)域之一。
　　本研究采用MTT法檢測(cè)了龍葵提取物澳洲茄堿對(duì)人類(lèi)肺癌細(xì)胞株A549及小鼠lewis肺癌細(xì)胞株LLC的抑制效果;以稍高半致死劑量的澳洲茄堿分別處理兩種肺癌細(xì)胞,

3、并進(jìn)行了細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察;以稍高半致死劑量的澳洲茄堿處理A549細(xì)胞,并進(jìn)行了AnnexinV/PI雙染流式細(xì)胞分析和熒光定量PCR分析p53通路的下游因子Puma基因的表達(dá);最后,采用MTT法比較了澳洲茄堿與其水解苷元澳洲茄胺(solasodine)之間在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,抑制相同的兩種肺癌細(xì)胞的藥效作用。
　　結(jié)果表明,澳洲茄堿對(duì)A549和LLC肺癌細(xì)胞均有明顯的抑制作用,澳洲茄堿對(duì)兩種肺癌的抑制作用基本上呈現(xiàn)與濃度成正比的趨勢(shì)

4、,并得出澳洲茄堿對(duì)A549和LLC的24小時(shí)IC50值分別為約18和20μg/mL;細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察表明以終濃度為20μg/mL澳洲茄堿處理的A549細(xì)胞大多呈現(xiàn)細(xì)胞膜皺縮樣的垂死形態(tài);annexinV/PI流式細(xì)胞分析結(jié)果表明以20μg/mL澳洲茄堿處理24小時(shí)的細(xì)胞的總死亡率為42.43％((Q2+Q3)/(Q2+Q3+Q4)),其中,早期凋亡細(xì)胞占總死亡細(xì)胞約22.08%(Q3/(Q2+Q3)),晚期凋亡或晚期凋亡和壞死細(xì)胞約占77

5、.92%(Q2/(Q2+Q3));SYBR綠色熒光定量PCR數(shù)據(jù)顯示,澳洲茄堿的處理顯著提高了A549癌細(xì)胞中p53通路的下游因子Puma基因的表達(dá)水平;澳洲茄胺對(duì)A549和LLC肺癌細(xì)胞均有明顯的抑制作用,其抑制作用基本上呈現(xiàn)與濃度成正比的趨勢(shì),并得出澳洲茄胺對(duì)A549和LLC的24小時(shí)IC50值均約為7.5μg/mL。
　　研究表明,澳洲茄堿能明顯抑制肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng),其方式主要是誘發(fā)細(xì)胞凋亡或細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死,并且與p53通