PLGF、Bcl-2及FasL在胎兒生長受限中的研究.pdf

1、胎兒生長受限(fetal growth restriction，簡稱FGR)是指孕37周后，胎兒出生時體重小于2500g；或者低于同孕齡平均體重的兩個標準差；或者低于同孕齡正常體重的第10個百分位數(shù)。其發(fā)病率2.75％～15.53％不等，并且圍產(chǎn)兒的死亡率為正常兒的4～6倍，是引起圍產(chǎn)期的重要并發(fā)癥之一，居圍產(chǎn)兒死亡原因第二位。他不僅導(dǎo)致胎兒發(fā)育異常，遠期也影響兒童期及青春期的體能與智能發(fā)育，心血管及糖尿病等患病率也明顯升高。胎兒生長受

2、限的病因在國內(nèi)外已有較多的研究，但目前病因仍不十分明確。
　　 目的
　　 為探討FGR孕婦母血、臍血中胎盤生長因子(placenta growth factor，PLGF)水平及胎盤組織中的Bcl-2(B-cell lymphoma/lenkemiaz，Bcl-2)與FasL(Fasrymndrit Fas，F(xiàn)asL)表達情況，以及探討三者間的相關(guān)性及其在FGR發(fā)生中的作用。
　　 材料與方法
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3、研究對象選擇鄭州大學第三附屬醫(yī)院2008年7月至2009年5月住院分娩的FGR孕婦40例，同期住院的正常孕婦(對照組)30例。兩組孕婦平均年齡為(27.35±2.46)歲，平均孕齡為(38.52±1.28)周。所有孕婦均為單胎、初產(chǎn)婦、月經(jīng)周期規(guī)律、排除肝腎功能異常、無任何妊娠合并癥和并發(fā)癥、無宮縮、剖官產(chǎn)分娩者。
　　 2標本采集
　　 孕婦分娩前抽取肘靜脈血3ml，胎兒娩出后立即抽臍靜脈血3ml。標本采集后經(jīng)離心(3

4、000r/min，10min)，吸取上清液后放入-80℃冰箱凍存待檢。胎盤自然娩出后迅速取母體面中央(避免鈣化灶)處約1.0cm×1.0cm×1.0cm小塊組織，標本采集后立即用生理鹽水沖洗，洗凈血液后置入10％甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片。常規(guī)HE染色，分別觀察胎盤組織形態(tài)以判斷切片好壞。
　　 3結(jié)果判定
　　 用酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)檢測兩組臍血、母血血清中PLGF濃度，用免疫組化SP法檢測胎盤

5、組織中Bcl-2、FasL表達。以PBS液代替一抗作陰性對照，并設(shè)陽性對照，實驗步驟嚴格按照產(chǎn)品說明書操作。
　　 胎盤組織中細胞膜和/或細胞漿呈黃色或棕黃色顆粒者為陽性表達，以陽性區(qū)平均灰度值為檢測指標。每張免疫組化切片隨機選取5個具有代表意義的高倍視野(10×40)，計算其陽性區(qū)平均光密度值。采用上海山富科學儀器有限公司的Biosens Digatal Imaging Systerm對兩指標進行灰度值分析。
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6、統(tǒng)計學方法
　　 采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，所有數(shù)據(jù)均采用((?)±s)表示，并且對數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗，兩個均數(shù)間比較采用t檢驗，兩因素相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。檢驗水準α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1兩組研究對象一般資料比較：FGR組與對照組相比，年齡和孕周的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2 PLGF在兩組母血、臍血中的表達比較：FGR組與對照組相比，F(xiàn)GR組明顯低于對

7、照組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 3 Bcl-2在兩組胎盤組織中的表達：在正常組胎盤組織中Bcl-2陽性表達于細胞胞漿或細胞膜，在FGR中相對于正常組織顯示弱陽性低表達。FGR組和對照組胎盤組織每高倍鏡視野平均灰度值分別為(59.77±9.77)、(79.45±7.19)；FGR組中Bcl-2平均灰度值明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4 FasL在兩組胎盤組織中的表達：Fa

8、sL在正常胎盤組織胞膜中強陽性表達，在FGR中呈弱陽性表達。FGR組和對照組每高倍鏡視野平均灰度值分別為(64.05±8.78)、(83.72±9.61)；FGR組中FasL平均灰度值明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 5 PLGF與兩組胎盤組織中Bcl-2、FasL蛋白表達的相關(guān)性：對照組母血、臍血中PLGF與Bcl-2、FasL表達無相關(guān)性(P均＞0.05)。FGR組母血、臍血中PLGF與Bcl-2、F