鞘內注射氟代檸檬酸對骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用.pdf

1、本文分為三部分進行論述： 第一部分大鼠骨癌痛動物模型的建立。 目的：通過行為學、放射學、病理學等方法，建立并評價大鼠骨癌痛模型。 方法：將大鼠腹水傳代培養(yǎng)的Walker-256腫瘤細胞，種植于SD大鼠左側脛骨上端，建立骨癌痛動物模型。16只SD大鼠隨機分為2組(每組8只)：假手術組(sham緝)和骨癌痛組，分別于左側脛骨注射Hanks液和Walker-256腫瘤細胞。于注射前1天、注射后1、3、7、14、21天觀

2、察大鼠的體重和疼痛痛行為學的變化。疼痛行為學包括以von Frey纖維絲刺激足底測量機械縮足閾值(PWMT)、熱輻射縮足反射潛伏期(TWL)、行走后足使用評分。骨癌痛組大鼠于建模后第6、12、18天進行X線檢查評估脛骨破壞程度，第21天取罹患腫瘤的脛骨進行組織切片，HE染色光鏡下觀察腫瘤組織和骨結構破壞情況。 結果： 1)：骨癌痛組大鼠在建模后第14、21天的體重與基礎值和假手術組比較顯著下降(P<0.01)，而假手術組

3、大鼠體重與基礎值比較增加(P<0.05)。 2)骨癌痛組大鼠從建模后第5天開始，車后爪PWMT顯著降低，低于術前的基礎值(P<0.01)，并持續(xù)下降至建模后第21天；與假手術組和基礎值比較差異明顯(P<0.01)；骨癌痛組大鼠術后第3天左后爪TWL下降，與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，第5～21天，骨癌痛組大鼠TWL值又逐漸恢復，與假手術組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>O．05)；骨癌痛組大鼠第14天開始出現(xiàn)行走

4、使用評分下降，與基礎值和假手術組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 3)骨癌痛組大鼠左側脛骨X線攝片可見明顯的骨破壞，左脛骨病理切片顯示腫瘤細胞生長。 結論：疼痛行為學、放射學、組織學多方面研究的結果表明大鼠骨癌痛模型建立成功。 第二部分脊髓膠質細胞在脊髓癌痛中的作用。 目的：通過免疫組化方法觀察脊髓膠質細胞在脊髓的表達，探討脊髓膠質細胞在骨癌痛成因中的作用。 方法：20只SD大鼠分為2組

5、：假手術組(n=5)和骨癌痛組(n=15)，骨癌痛組分別在術后第7d、14d、21d各處死5只大鼠取腰段脊髓，假手術組術后7d取腰段脊髓。采用免疫組化方法分別測定脊髓星形膠質細胞的標志物膠質纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)和小膠質細胞標志物OX-42陽性細胞在脊髓的表達。 結果： 1)術后第7天骨癌痛組大鼠脊髓GFAP表達開始增加，至第14天明顯增加，持續(xù)增加至術后

6、21天，與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 2)術后第7天骨癌痛組大鼠脊髓OX-42表達開始增加，至第14天明顯增加，持續(xù)增加至術后21天，與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 結論：骨癌痛大鼠脊髓膠質細胞表達隨著病程的發(fā)展逐漸增加，表明脊髓膠質細胞可能參與了大鼠骨癌痛的形成。 第三部分鞘內注射氟代檸檬酸對骨癌痛大鼠痛閾的影響。 目的：研究特異性膠質細胞代謝抑制劑氟代檸檬酸(

7、Fluorocitrate，F(xiàn)C)對骨癌痛大鼠機械痛閾的影響。 方法：12只大鼠隨機分為2組，PBS組，骨癌痛模型十PBS組：FC組，骨癌痛模型十FC組。大鼠骨癌痛模型建立后當天鞘內置管，置管后14d鞘內分別注射PBS10μl、FC1nmol(10μl)，給藥前1h(baseline)和給藥后1、2、4、6、8、10、12、24h測定機械縮足反射閾值(Paw withdrawl mechanical threshold，PWMT