腺病毒介導(dǎo)白介素-24對(duì)脛骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng).pdf

1、目的： 觀察腺病毒介導(dǎo)白介素-24(Ad-IL-24)對(duì)脛骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，探討其可能機(jī)制。 方法： 將已構(gòu)建好的攜帶有IL-24基因的重組復(fù)制缺陷型病毒(Ad-IL-24)和空病毒載體(Ad-GFP)轉(zhuǎn)染QBI-293A細(xì)胞，多輪擴(kuò)增后獲得高效價(jià)的病毒，并進(jìn)行病毒效價(jià)測(cè)定；采用RT-PCR法檢測(cè)Ad-IL-24在Walker256細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄；在倒置熒光顯微鏡下觀察Ad-IL-24在Walker256細(xì)胞中

2、的表達(dá)；MTT比色法、流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry，F(xiàn)CM)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡情況；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)Ad-IL-24體外對(duì)細(xì)胞因子β-內(nèi)啡肽分泌的影響。取雌性SD大鼠，體重180～200g，設(shè)正常對(duì)照組(n=8)，其余建立脛骨癌痛模型，然后隨機(jī)分組：PBS陰性對(duì)照組(PBS組)、Ad-GFP空載體對(duì)照組(Ad-GFP組)、Ad-IL-24實(shí)驗(yàn)組(IL-24組)和唑來(lái)膦酸陽(yáng)性對(duì)照組(唑來(lái)膦酸組)(n=8)，建模后第9天分別

3、在術(shù)側(cè)后肢局部皮下注射PBS、Ad-GFP、Ad-IL-24和唑來(lái)膦酸，隔天給藥，共3次，在給藥后測(cè)量大鼠的機(jī)械痛閾和熱痛閡閾值。并在建模后第14天，取術(shù)側(cè)后肢脛骨組織進(jìn)行HE染色，觀察腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)情況和骨小梁破壞情況；取血漿檢測(cè)細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、β-內(nèi)啡肽、IFN-γ的變化。 結(jié)果： 腺病毒介導(dǎo)白介素-24基因能在Walker256細(xì)胞中表達(dá)；Ad-IL-24在體外實(shí)驗(yàn)中能抑制Walker256細(xì)胞的生長(zhǎng)；

4、Ad-IL-24在體外實(shí)驗(yàn)中能上調(diào)細(xì)胞因子β-內(nèi)啡肽的表達(dá)；在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中Ad-IL-24組與PBS干預(yù)組、Ad-GFP組的大鼠機(jī)械痛閾變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，Ad-IL-24組與唑來(lái)膦酸組變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；所有各組之間的熱痛閾無(wú)明顯差異(P>0.05)：組織學(xué)結(jié)果示PBS組和Ad-GFP組大鼠的腫瘤突破骨皮質(zhì)向外浸潤(rùn)生長(zhǎng)，而Ad-IL-24組和嘩來(lái)膦酸組大鼠的骨皮質(zhì)完整；HE染色結(jié)果示，PBS組和Ad-GFP組