葡萄籽原花青素對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防干預(yù)及分子機(jī)理研究.pdf

1、目的:通過(guò)飼喂高膽固醇建立兔AS動(dòng)物模型,觀察GSPE對(duì)AS的預(yù)防作用,并從以下幾方面探討其作用機(jī)制:(1)研究GSPE對(duì)血脂的影響;(2)通過(guò)觀察GSPE對(duì)氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影響,研究其抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用;(3)通過(guò)觀察GSPE對(duì)C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、白細(xì)胞介素6(in

2、terleukin 6,IL-6)的影響,研究其抗內(nèi)皮炎癥作用;(4)通過(guò)觀察GSPE對(duì)細(xì)胞間黏附分子(jntercellularadhesion molecule,ICAM-1)、血管細(xì)胞黏附分子(vascular cell adhesionmolecuIe,VCAM-1)、E-選擇素的影響,研究其抗內(nèi)皮粘附作用.方法:1、建立AS動(dòng)物模型并進(jìn)行GSPE預(yù)防干預(yù)選購(gòu)雄性新西蘭大白兔30只,分籠喂養(yǎng),飲水不限,飼料量為每只每天100~1

3、20g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn).將其隨機(jī)分為正常對(duì)照(A)、高脂模型(B)、GSPE預(yù)防干預(yù)(C)3組,每組1 0只,分別飼喂標(biāo)準(zhǔn)、標(biāo)準(zhǔn)+1％膽固醇、標(biāo)準(zhǔn)+1％膽固醇+1％GSPE的顆粒飼料.各組兔分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前1天及開(kāi)始后第1、2、4、8周末,在清晨空腹稱重后,經(jīng)耳中動(dòng)脈采血.于實(shí)驗(yàn)的第12周末,各組兔全部在清晨空腹稱重后,經(jīng)耳中動(dòng)脈采血后處死,留取主動(dòng)脈、心、腦、腎組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和免疫組織化學(xué)檢查.2、血清學(xué)研究取上述3組兔

4、的空腹血清標(biāo)本,應(yīng)用日立71 70型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定其血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(loWdensity lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosor

5、bent assay,ELISA)雙抗體夾心法測(cè)定血漿ox-LDL含量;應(yīng)用比色法測(cè)定血清MDA含量;應(yīng)用酶免疫測(cè)定(enzyme immunoassay,EIA)法測(cè)定CRP含量;應(yīng)用ELISA雙抗體夾心法測(cè)定IL-6、ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素含量.3、病理學(xué)研究取上述3組兔的主動(dòng)脈、心、腦、腎組織標(biāo)本進(jìn)行病理組織切片,應(yīng)用光鏡和透射電鏡觀察主動(dòng)脈、心、腦、腎組織標(biāo)本病理改變并拍照,并應(yīng)用CD68和α-actin免疫組織