甘藍(lán)型冬油菜內(nèi)生細(xì)菌多樣性及生防潛力評(píng)估.pdf

1、植物內(nèi)生菌(endophytes)是指其整個(gè)生長(zhǎng)周期或者其中某個(gè)時(shí)期可以在植物組織內(nèi)生存，且不會(huì)引起宿主植物產(chǎn)生明顯有害癥狀的微生物。其中，植物內(nèi)生細(xì)菌存在普遍，具有多種生物學(xué)作用。本研究旨在分析武漢地區(qū)甘藍(lán)型冬油菜內(nèi)生細(xì)菌的多樣性，從中篩選出可以促進(jìn)油菜生長(zhǎng)、抑制油菜菌核病的細(xì)菌菌株，并初步評(píng)估其生防潛力。取得的主要研究成果如下:
　　1.采用組織分離法，從采集的武漢地區(qū)甘藍(lán)型冬油菜樣品中分離得到了134株內(nèi)生細(xì)菌;通過(guò)16S

2、rDNA測(cè)序分析，將其鑒定為18個(gè)屬33個(gè)種。其中芽孢桿菌屬(Bacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、寡養(yǎng)單胞菌屬(Stenotrophomonas)數(shù)量最多，分別占總菌株數(shù)的46.27％、15.67％和11.94％。多樣性分析結(jié)果表明，整體而言，內(nèi)生細(xì)菌的辛普森指數(shù)為0.936，說(shuō)明油菜內(nèi)生細(xì)菌存在著高水平多樣性。根、莖和葉等部位組織內(nèi)生細(xì)菌香農(nóng)指數(shù)分別為2.847、2.808和2.356，辛普森指數(shù)分別為0.956

3、、0.939和0.907，可見(jiàn)油菜根部?jī)?nèi)生細(xì)菌最豐富，莖部次之。
　　2.在盆栽試驗(yàn)中，用內(nèi)生細(xì)菌浸泡油菜種子及苗期灌根，計(jì)生長(zhǎng)60天后油菜幼苗干重。得到了4株可以顯著促進(jìn)油菜生長(zhǎng)的菌株。它們是Pseudomonas sp.CanR-81、Pseudomonas hibiscicola CanR-74、Bacillus amyloliquefaciens CanS-3和CanL-23。
　　3.利用PDA平板篩選與離體油菜葉

4、片篩選相結(jié)合的方式，得到了可以穩(wěn)定抑制核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）生長(zhǎng)的3株內(nèi)生細(xì)菌。它們是Bacillus subtilisCanL-30、Stenotrophomonas sp.CanR-75和Bacillusamyloliquefaciens CanR-76。
　　4.在培養(yǎng)基平板、活體油菜以及離體油菜葉片上，對(duì)上述3株拮抗性內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行了生防潛力評(píng)估，結(jié)果表明，菌株CanL-30可以通過(guò)產(chǎn)生抗