三種藥用植物內(nèi)生細(xì)菌的多樣性研究.pdf

1、本研究以生長(zhǎng)于高海拔、強(qiáng)輻射、溫度波動(dòng)較大的三種青藏高原移栽的藥用植物-黨參，黃芪，連翹為研究對(duì)象，利用經(jīng)典的分離培養(yǎng)的方法和分子生物學(xué)技術(shù)即PCR-RFLP和16SrRNA基因序列分析，對(duì)3種藥用植物內(nèi)生細(xì)菌的形態(tài)和生理特性以及遺傳多樣性進(jìn)行了研究，并探討了環(huán)境與植物內(nèi)生細(xì)菌之間的相互關(guān)系。其主要研究結(jié)果如下： 1.三種青藏高原移栽的藥用植物-黨參，黃芪，連翹中普遍存在內(nèi)生細(xì)菌，并且菌群類(lèi)型較為豐富。從三種藥用植物中共分離到4

2、2株內(nèi)生細(xì)菌，分屬于微球菌屬(Micrococcus sp.)，芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)，顯核菌屬(Caryophanon sp.)，黃桿菌屬(Flavobacterium sp.)，金黃桿菌屬(Chryseobacterium sp.)，鞘氨醇桿菌屬(Sphingobacterium sp.)，不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter sp.)，考克氏菌屬(Kocuria sp.)，芽胞八疊球菌屬(Sporosarcina

3、 sp.)九個(gè)屬。 2.對(duì)所分離出來(lái)的黨參，黃芪，連翹三種移栽的藥用植物內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行形態(tài)特征，革蘭氏染色以及生長(zhǎng)溫度范圍的觀察和測(cè)定結(jié)果表明，三種藥用植物中的內(nèi)生細(xì)菌以及同種植物不同分離物之間，其菌落形態(tài)和菌體形態(tài)以及一些生理特性也呈現(xiàn)出多樣性的特征。 革蘭氏染色結(jié)果顯示，58.33％的內(nèi)生細(xì)菌菌體形態(tài)為桿狀，其余為球狀，且各菌株間菌體大小差異較大；有58.33％為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌；還有83.33％的菌株可產(chǎn)生黃色、橘紅或

4、肉紅色色素。 另外，不同植物體內(nèi)的內(nèi)生細(xì)菌以及同種植物不同分離物之間，其培養(yǎng)特性如對(duì)溫度的敏感性也不同。三種藥用植物內(nèi)生細(xì)菌的這些特性可能與其宿主所處的低溫，紫外輻射強(qiáng)度較大的環(huán)境有關(guān)。 3.從三種移栽的藥用植物-黨參，黃芪，連翹中所分離出來(lái)的內(nèi)生細(xì)菌是由四大類(lèi)群β-proteobacteria、高G+C含量的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(HGC)、低G+C含量的革蘭氏陰性(LGC)、細(xì)菌和嗜纖維菌/黃桿菌/擬黃桿菌群(CFB)組成，

5、有9個(gè)屬的細(xì)菌分布。其中HGC類(lèi)群的種類(lèi)多樣性最豐富，占41.67％；而微球菌屬(Micrococcus)為優(yōu)勢(shì)菌。其次為L(zhǎng)GC和CFB類(lèi)群，均占25％，其種屬分布較為分散。 4.三種移栽的藥用植物-黨參，黃芪，連翹內(nèi)生細(xì)菌的理化性質(zhì)在一定程度上受到所生長(zhǎng)的環(huán)境因子影響，植物內(nèi)生細(xì)菌的理化性質(zhì)在一定程度上也反映了當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境氣候特點(diǎn)。 5.三種移栽的藥用植物-黨參，黃芪，連翹中的內(nèi)生細(xì)菌對(duì)抗生素均有一定的抗藥性，這在極大程