廣西水稻內(nèi)生細(xì)菌多樣性分析及對(duì)水稻紋枯病菌的拮抗作用測(cè)定.pdf

1、水稻紋枯病是廣西水稻生產(chǎn)中重要的病害之一，防治該病的主要措施是噴灑井崗霉素。井崗霉素的大量使用，造成病原菌的抗藥性，防治效果下降。利用有益微生物防治水稻紋枯病是目前該病防治研究的一個(gè)重要方向。本研究對(duì)廣西水稻內(nèi)生細(xì)菌的多樣性進(jìn)行分析，在此基礎(chǔ)上篩選對(duì)紋枯病菌有抑制作用的拮抗菌株，結(jié)果如下：
　　 1、從廣西稻區(qū)的晚稻68種水稻品種中采集了222個(gè)水稻標(biāo)樣，分離出1415株菌株，經(jīng)形態(tài)、生理生化測(cè)定和16s rDNA序列分析，這些

2、菌株分屬于5個(gè)屬：芽孢桿菌屬（Bacillus）、鞘胺醇單孢菌屬（Sphingomonas）、土壤桿菌屬（Agrobacterium）、伯克霍爾德氏菌屬（Burkholderia）和腸桿菌屬（Enterobacter）。其中，芽孢桿菌屬（Bacillus）和土壤桿菌屬（Agrobacterium）為主要類(lèi)群。芽孢桿菌屬（Bacillus）在不同地區(qū)、不同水稻品種、不同的生育時(shí)期以及不同器官中的數(shù)量都占有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，為水稻內(nèi)生細(xì)菌的優(yōu)勢(shì)類(lèi)群

3、。
　　 2、水稻內(nèi)生細(xì)菌的類(lèi)群隨不同地區(qū)而異，如：博優(yōu)679水稻品種在桂西（百色）種植沒(méi)有分離出Sphingomonas和Burkholderia，而在桂北（河池）種植分離到了這兩種類(lèi)群。
　　 3、水稻內(nèi)生細(xì)菌類(lèi)群也隨不同水稻品種而異，如：在百色采集的標(biāo)樣中，Sphingomonas和Burkholderia存在于特優(yōu)273、特優(yōu)253和博優(yōu)228中，而博優(yōu)258、博優(yōu)679和特優(yōu)998中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這兩類(lèi)細(xì)菌。

4、　　 4、水稻內(nèi)生細(xì)菌的類(lèi)群和數(shù)量隨水稻植株不同器官而變化。如：種植在廣西大學(xué)農(nóng)場(chǎng)的柳沙油202號(hào)品種，植株的根部分離到Enterobacte，而葉鞘和葉組織分離不到這一細(xì)菌。水稻內(nèi)生細(xì)菌主要類(lèi)群Bacillus和Agrobacterium在水稻不同器官中的數(shù)量，以根組織中含量最高（6.9×103 cfu/mL和8.0×103 cfu/mL），其次是鞘（4.0×103 cfu/mL和6.0×103 cfu/mL）和葉組織（2.3×10

5、3 cfu/mL和0）。
　　 5、水稻內(nèi)生細(xì)菌類(lèi)群和數(shù)量也隨水稻不同生育期而變化。如：種植在廣西大學(xué)農(nóng)場(chǎng)的柳沙油202號(hào)品種，在孕穗期可分離到Burkholderia，而在其他生育期分離不到這類(lèi)細(xì)菌；水稻內(nèi)生細(xì)菌Bacillus，Agrobacterium，Burkholderia和Enterobacter類(lèi)群的數(shù)量，在苗期到孕穗期逐漸上升，從灌漿期到乳熟期下降。
　　 6、從375株水稻內(nèi)生細(xì)菌菌株中篩選出對(duì)水稻紋枯

6、病菌有拮抗作用的菌株69株，其中，B1693菌株對(duì)水稻紋枯病菌拮抗作用較強(qiáng)。經(jīng)形態(tài)、生理生化測(cè)定和16s DNA序列分析，B1693菌株被鑒定為巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium）。該菌株生長(zhǎng)最適溫度為35℃，最適pH為7.0-8.0，能利用蔗糖、葡萄糖、甘露醇、甜醇、D-果糖和D-木糖等碳源和蛋白胨、酵母浸膏、牛肉浸膏、甘酪素等有機(jī)氮，硝酸鉀和硫酸銨等氮源。通過(guò)對(duì)B1693菌株的離體和盆栽防治效果測(cè)定，先接拮抗菌后接