玉屏風(fēng)散防治人偏肺病毒感染的實驗研究.pdf

1、本文主要從以下兩部分展開論述:
　　第一部分：玉屏風(fēng)散預(yù)防人偏肺病毒感染的實驗研究
　　目的：人偏肺病毒（Humanmetapneumovirus,hMPV）是嬰幼兒呼吸道感染重要的病毒病原，目前尚無有效預(yù)防和治療藥物。本研究探討玉屏風(fēng)對小鼠感染hMPV的保護作用。方法：將40只BALB/c小鼠隨機分為5組，實驗組經(jīng)不同劑量玉屏風(fēng)灌胃14天后，滴鼻感染熒光標(biāo)記的重組hMPV。感染后第5d處死小鼠，無菌狀態(tài)下取肺組織，左肺用于

2、病理切片，RT-PCR法檢測hMPV感染；右肺稱重，按每克肺組織加入10ml鼠肺組織緩沖液，4℃勻漿，通過改良噬斑形成法檢測肺組織勻漿中hMPV滴度。結(jié)果：（1）HE染色提示大劑量玉屏風(fēng)組比病毒對照組小鼠肺組織炎癥程度顯著減輕（病理評分5.13±0.84vs15.25±1.49，P<0.001）；（2）病毒對照組、小劑量組、中劑量組、大劑量組肺內(nèi)平均病毒滴度分別為(2.33±0.98)×105、(2.08±0.11)×105、(5.08

3、±1．46)×104、(2.17±0.75)×102，肺內(nèi)病毒滴度與肺組織病理評分呈正相關(guān)（r=0.844，p<0.001）。結(jié)論：大劑量玉屏風(fēng)預(yù)防可顯著抑制hMPV在小鼠肺內(nèi)復(fù)制水平，減輕肺組織病理損害。玉屏風(fēng)預(yù)防病毒感染的機制是以直接抗病毒作用抑或調(diào)節(jié)機體抗病毒免疫功能為主尚待進一步研究。
　　第二部分：玉屏風(fēng)散對哮喘小鼠感染人偏肺病毒干預(yù)機制的探討
　　目的：建立人偏肺病毒（Humanmetapneumovirus,h

4、MPV）感染的哮喘小鼠模型，驗證玉屏風(fēng)散對hMPV誘導(dǎo)的哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性和炎癥的療效并初步探討其機理。方法：隨機將48只雌性BALB/c小鼠分為對照組(A組)、哮喘組(B組)、偏肺病毒哮喘組(C組)、小劑量玉屏風(fēng)組(D組)、中劑量玉屏風(fēng)組(E組)、大劑量玉屏風(fēng)組(F組)，采用卵蛋白致敏和激發(fā)，hMPV滴鼻方法建立哮喘人偏肺病毒感染模型并給予玉屏風(fēng)治療,采用動物體描箱法測定氣道反應(yīng)性；采用支氣管肺泡灌洗液（BALF）進行細胞分類計數(shù)；

5、肺組織病理切片HE染色觀察炎性細胞浸潤；采用流式細胞術(shù)分別測定肺部細胞因子IFN-γ和IL-4、IL-17。結(jié)果：（1）隨吸入乙酰甲膽堿濃度增加各組氣道反應(yīng)性明顯增加，C組比B組氣道反應(yīng)性顯著升高（P<0.05）；F組氣道反應(yīng)性明顯降低，低于C組（P<0.05）；（2）各組BALF中白細胞總數(shù)及炎癥細胞數(shù)都比對照組顯著升高，C組BALF中白細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞與B組、F組相比顯著升高（P<0.05）；（3）各哮喘組的炎癥評分都顯著高于

6、對照組。在細支氣管周圍炎，肺泡炎方面B組和F組比C組明顯減輕（P<0.05）。（4）A、B組IFN-γ無差異（P>0.05），各劑量組IFN-γ，IFN-γ/IL-4均顯著高于B、C組(P<0.05)；哮喘組、治療組IL-4顯著高于正常組(P<0.01)，但各組間無明顯差異；與B組相比，C組IL-17水平明顯升高(P<0.05)；與C組相比，E、F組IL-17水平明顯降低。結(jié)論：大劑量玉屏風(fēng)散可以抑制感染hMPV哮喘小鼠的氣道高反應(yīng)性及