1、目的：
對2012年手足口病流行期間天津市兒童醫(yī)院收治入院的重癥手足口病(HFMD)患兒進(jìn)行病原學(xué)分析，了解重癥病例腸道病毒71型(EV71)的檢出和其他病原體的流行趨勢變化，探討不同臨床標(biāo)本及IgM抗體檢測對于EV71感染的早期診斷價值，同時通過VP1全基因擴(kuò)增了解EV71流行株的的型別和基因特征，為天津市EV71病毒毒株的基因庫及其分子流行病學(xué)研究補(bǔ)充資料，為本地區(qū)重癥手足口病的監(jiān)測、治療和預(yù)后提供參考。
方法：
2、
以2012年7月至9月天津市兒童醫(yī)院收治入院的98例重癥手足口病患兒為研究對象，收集臨床標(biāo)本共188份，包括咽拭子79份，糞便86份，腦脊液23份，其中67例患兒同時留取咽拭子和糞便標(biāo)本。整理患兒臨床資料，提取病毒核酸，采用三通道一步法實(shí)時熒光RT-PCR檢測總腸道病毒(EV)、腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇病毒A組16(CA16)，同時采用ELISA法檢測患者血清中的EV71特異性IgM抗體。然后從EV71陽性標(biāo)本中選
3、取部分病例進(jìn)行EV71的VP1全基因擴(kuò)增，并進(jìn)行核苷酸序列比對和遺傳進(jìn)化分析。
結(jié)果：
98例重癥HFMD患兒中EV71的陽性率為60.2％(59/98); CA16的陽性率為10.2％(10/98);非EV71非CA16的其他類型腸道病毒(NENC)占16.3％(16/98); EV總陽性率為82.7％(81/98)，同時有4例患兒為EV71和CA16雙陽性。本組重癥病例中男女性患兒的比例大約為2∶1，二者的腸道病
4、毒檢出率無顯著統(tǒng)計學(xué)差異。5歲以下的患兒占95.9％，75.5％在6個月到2歲之間，不同年齡組患兒的腸道病毒檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。糞便標(biāo)本的腸道病毒陽性率顯著高于咽拭子標(biāo)本，分別為82.6％和53.2％。23份腦脊液標(biāo)本中均未檢測到腸道病毒核酸。ELISA法檢測的血清EV71IgM抗體陽性率為70.4％，高于熒光RT-PCR檢測的病毒核酸陽性率(60.2％)。16株EV71VP1全基因序列的遺傳進(jìn)化分析表明本研究中的EV71毒株屬于C
5、4a亞型。
結(jié)論：
1、2012年天津市重癥手足口病的病原體以EV71為主，其次是EV71和CA16以外的其他腸道病毒。
2、重癥手足口病的易感人群為5歲以下的兒童，尤其是2歲以下患兒，應(yīng)警惕幼齡兒童發(fā)展為重癥的可能，但是腸道病毒檢出率無明顯性別和年齡差異。
3、糞便標(biāo)本的病毒檢出率高于咽拭子，檢測結(jié)果更穩(wěn)定，更適合做病原學(xué)檢測以輔助疾病的早期診斷，腦脊液中不易檢測到病毒。
4、ELIS