Id-1在人結(jié)腸癌中的表達(dá)及與VEGF關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、V ‘ n 0 9 e 8 6分類號：R 7 3 5 2 學(xué)校代碼：1 0 3 9 2學(xué) 號：2 0 0 4 - 3 0 4福建醫(yī)科大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文I d ．1 在人結(jié)腸癌中的表達(dá)及與V E G F 關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究E x p r e s s i o n o f l d - Ii nH u m a n C o l o n C a r c i n o m a s a n dR e l a t i o n s h i p W i t h

2、 V E G F所在院( 系) t 協(xié)和臨床醫(yī)學(xué)院研究生：李文煉學(xué)科( 專業(yè)) ：腫瘤學(xué)導(dǎo) 師：盧輝山教授王川副教授研究起止時間：2 0 0 5 年1 1 月至2 0 0 6 年1 2 月二0 0 七年三月I d l 在人結(jié)腸癌中的表達(dá)及與V E G F 關(guān)系的試驗(yàn)研究摘要【目的】：研究I d l 及V E G F 在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)情況及它們之間的相關(guān)性，探討I d l 在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的作用；將正反義I d l 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)

3、染結(jié)腸癌S W 4 8 0 細(xì)胞，觀察對細(xì)胞增值、凋亡及對V E G F 表達(dá)的影響，為腫瘤的靶向治療提供一定的試驗(yàn)依據(jù)。【方法】： 1 ．應(yīng)用免疫組織化學(xué)法( S - P ) 檢測結(jié)腸癌組織及癌旁組織中I d l 及V E G F 的表達(dá)。2 ．轉(zhuǎn)染正反義I d l 重組質(zhì)粒于結(jié)腸癌S W 4 8 0 細(xì)胞并獲得穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)( R T - P C R ) 測定I d l m R N A 及V E G F m

4、 R N A 的表達(dá)；應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)法( S - P ) 檢測I d l 蛋白和V E G F 蛋白的表達(dá)；應(yīng)用M T T法檢測細(xì)胞的增值、凋亡情況。【結(jié)果】： 1 ．I d l 蛋白及V E G F 蛋白在結(jié)腸癌組織中高表達(dá)，在正常組織中低表達(dá)，且兩者的表達(dá)呈正相關(guān)。2 ．成功轉(zhuǎn)染三種質(zhì)粒( 正義、反義、空質(zhì)粒)于結(jié)腸癌細(xì)胞S W 4 8 0 中，并獲得穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株；免疫細(xì)胞化學(xué)、R T —P C R 方法檢測I d l 及V E

5、 G F 的結(jié)果顯示：與對照組比較，轉(zhuǎn)染正義I d l 質(zhì)粒組的m R N A 、蛋白表達(dá)明顯，而轉(zhuǎn)染反義I d l 質(zhì)粒組的表達(dá)顯著降低，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的表達(dá)介于兩者之間。3 ．m t t 法和細(xì)胞計數(shù)法測定細(xì)胞的生長曲線表明，與原結(jié)腸癌細(xì)胞S W 4 8 0 ( 對照組) 相比，轉(zhuǎn)染正義I d l 質(zhì)粒組的增殖速度稍快( P > O ．0 5 ) ，轉(zhuǎn)染反義I d l 質(zhì)粒組的增殖速度明顯慢( P0 ．0 5 ) 。I d l

6、蛋白與V E G F 蛋白的表達(dá)正相關(guān)，提示I d l 高表達(dá)可作為判斷結(jié)腸癌侵襲和進(jìn)展的一個潛在重要的指標(biāo)。2 ．轉(zhuǎn)染反義I d l 重組質(zhì)粒后，I d l 蛋白和V E G F 蛋白的表達(dá)降低，細(xì)胞增殖能力下降，而轉(zhuǎn)染正義I d l 重組質(zhì)粒的作用與其相反，提示可將I d l作為一個靶點(diǎn)成為結(jié)腸癌治療的一種新方法，并通過降低V E G F 的表達(dá)起到控制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。【關(guān)鍵詞】；結(jié)腸腫瘤；I d l ；V E G F ；增殖；凋亡