OTUB1在結腸癌中的表達及與其DCN關系的初步研究.pdf

1、目的：泛素-蛋白酶體途徑是調控細胞內蛋白質降解的重要途徑，涉及細胞周期調控、信號通路的轉導、細胞DNA修復、炎癥反應及腫瘤發(fā)展等多個方面。去泛素化酶可逆向調控該途徑。飾膠蛋白聚糖（decorin，DCN）是細胞外基質一種成分，能夠抑制腫瘤細胞生長、逆轉腫瘤細胞表型、抑制腫瘤血管生成。DCN主要通過泛素-蛋白酶體途徑進行降解。卵巢腫瘤相關蛋白酶B1（OTU domain-containing ubiquitin aldehyde-bind

2、ing protein B1，OTUB1)屬于去泛素化酶家族的成員，既可以抑制蛋白的泛素化，也可以促進泛素化過程。本研究旨在探討OTUB1在結腸組織中的表達，并進一步探討OTUB1與DCN之間的表達趨向。
　　方法：收集結腸癌、腺瘤、正常粘膜組織，采用免疫組織化學法檢測OTUB1在結腸組織的表達。應用RT-PCR檢測結腸癌組織中DCN的mRNA表達。選定穩(wěn)定轉染OTUB1的結腸癌細胞系lovo和轉染空載質粒結腸癌細胞系lovo（對

3、照組）作為研究對象，采用實時熒光定量PCR(Real time quantitative PCR，real time qPCR)和Western blotting，在mRNA和蛋白水平上檢測OTUB1與DCN的表達。
　　結果：①免疫組化：OTUB1在結腸癌組織中的表達明顯高于正常粘膜組織，差異具有統計學意義（P＜0.05）。②RT-PCR結果顯示結腸癌組織中擴增出的295bp目的DCN條帶明顯增亮，差異具有統計學意義（P＜0.0