熱休克蛋白20在大鼠急性尿潴留膀胱中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景及目的：
　　 急性尿潴留(Acute urinary retention，AUR)是臨床上常見的嚴(yán)重的排尿功能障礙，常導(dǎo)致嚴(yán)重逼尿肌收縮乏力(detrusor underactivity，DU)，其發(fā)病原因有很多種，臨床療效不理想，目前其病理機(jī)制仍不十分明確。
　　 正常的排尿功能，其動(dòng)力必須依靠健全的與排尿有關(guān)的肌肉細(xì)胞，其中最重要的就是膀胱逼尿肌細(xì)胞(Detrusor smooth muscle cell，DS

2、MC)。根據(jù)經(jīng)典的肌絲滑行理論，平滑肌的收縮有賴于粗細(xì)肌絲的相互滑動(dòng)產(chǎn)生相對(duì)位移導(dǎo)致的肌細(xì)胞長(zhǎng)度變化。這一過程牽涉到包括神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)受體、各種收縮相關(guān)蛋白以及多種酶的激活等事件。而細(xì)胞骨架的完整性是維持平滑肌可收縮性的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，同時(shí)也是多種損傷機(jī)制導(dǎo)致的平滑肌收縮功能障礙的共同通路。膀胱逼尿肌作為一種特殊的平滑肌，其收縮的調(diào)控機(jī)制似乎與骨骼肌更為相似，即對(duì)于收縮力和收縮精確性要求較高，因此穩(wěn)定和精密的肌絲結(jié)構(gòu)是保證逼尿肌正常收縮的基礎(chǔ)

3、。很多收縮相關(guān)蛋白(如鈣介素D，CaD)的異常可直接導(dǎo)致逼尿肌肌動(dòng)蛋白的異構(gòu)，并與逼尿肌細(xì)胞肥大變性等病理狀態(tài)的發(fā)生機(jī)制密切相關(guān)。
　　 熱休克蛋白20(heat shock protein20，Hsp20)是小分子熱休克蛋白家族中的一員，是Kato等人于1994年從骨骼肌組織中提純?chǔ)力?晶體蛋白、熱休克蛋白27(heat shockprotein27，Hsp27)時(shí)發(fā)現(xiàn)的。Hsp20在全身各組織器官中都有表達(dá)，主要分布在骨骼肌

4、、心肌、血管平滑肌、胃腸平滑肌和膀胱逼尿肌等組織中。研究表明，Hsp20具有調(diào)節(jié)血管、胃腸、子宮平滑肌收縮等生物學(xué)功能。Sonemany Salinthone等人研究發(fā)現(xiàn)Hsp20通過PKA通路磷酸化，磷酸化的Hsp20可與細(xì)肌絲結(jié)合，使磷酸化的肌球蛋白不能與細(xì)肌絲發(fā)生作用，從而抑制收縮，保持肌肉的松弛。但Hsp20在膀胱逼尿肌收縮功能中的作用及機(jī)制尚未見報(bào)導(dǎo)。
　　 本研究采用充盈性膀胱測(cè)壓、肌條興奮性和收縮性測(cè)定、Weste

5、rn blot、免疫熒光染色及激光共聚焦等技術(shù)，通過對(duì)比研究AUR大鼠不同時(shí)相點(diǎn)膀胱逼尿肌收縮力及Hsp20的表達(dá)情況，初步探討AUR后膀胱收縮功能和Hsp20表達(dá)的關(guān)系及相關(guān)機(jī)制，旨在為臨床治療提供新的思路。
　　 方法：
　　 本課題以成年雌性SD大鼠為研究對(duì)象，通過結(jié)扎尿道口的方法建立大鼠急性尿潴留動(dòng)物模型，利用充盈性膀胱測(cè)壓的方法檢測(cè)不同時(shí)相點(diǎn)(0h、1h、6h、12h、24h、3d、5d、7d)膀胱收縮功能變化

6、；行離體逼尿肌肌條實(shí)驗(yàn)，觀察大鼠逼尿肌肌條興奮性及收縮性的變化；采用免疫熒光染色的方法分別檢測(cè)急性尿潴留膀胱排空后不同時(shí)相點(diǎn)(0h、1h、6h、12h、24h、3d、5d、7d)大鼠膀胱逼尿肌Hsp20的表達(dá)情況；采用Western blot的方法比較尿潴留后不同時(shí)相點(diǎn)Hsp20含量的差異。初步探討急性尿潴留后膀胱收縮功能改變與熱休克蛋白20表達(dá)變化的關(guān)系及相關(guān)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件

7、處理。樣本均數(shù)間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。結(jié)果以P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。
　　 結(jié)果：
　　 1、AUR后1h、6h、12 h、24 h大鼠逼尿肌收縮力(單位：cmH2O52.94±2.40、41.13±2.18、39.14±3.76、32.16±2.30)呈時(shí)間依賴性遞減，均較0h組(60.65±4.81cmH2O)顯著下降(P<0.05)；3d、5d、7d組最大逼尿肌壓(單位：cmH2O42.32

8、±4.47、45.28±4.64、49.71±2.17)較1h、6h、12h和24h組顯著回升，但仍低于0h組和對(duì)照組(P<0.05)；。
　　 2、AUR組大鼠逼尿肌肌條收縮頻率較對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，而且收縮幅度有降低趨勢(shì)。
　　 3、AUR各組Hsp20表達(dá)明顯高于對(duì)照組，梗阻后24h內(nèi)Hsp20表達(dá)呈逐步上升趨勢(shì)，而24h至7d則是逐漸降低的，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：