一種南海珊瑚與一株珊瑚共附生真菌次級代謝產(chǎn)物及斑馬魚魚毒活性研究.pdf

1、珊瑚及其共附生微生物是海洋天然產(chǎn)物的重要來源。珊瑚次級代謝產(chǎn)物有萜類、甾體類、前列腺素類、生物堿類等,大量化合物表現(xiàn)出了顯著的生物活性,具有廣闊的藥用開發(fā)前景。海洋微生物是海洋天然產(chǎn)物研究的熱點之一,從中發(fā)現(xiàn)了許多結(jié)構(gòu)新穎、有強藥理活性的化合物。特別是海洋共附生微生物可能參與宿主次級代謝產(chǎn)物的生物合成,己引起廣泛關注。珊瑚體內(nèi)也共生著大量的微生物,但目前對珊瑚共附生微生物次級代謝產(chǎn)物的研究尚不多。本研究對一種南海珊瑚與一株珊瑚共附生真菌

2、次級代謝產(chǎn)物進行研究,并對珊瑚、珊瑚共附生真菌等來源的化合物進行斑馬魚魚毒等活性篩選評價,并對構(gòu)效關系進行了探討。
　　對一種南海肉芝軟珊瑚.Sarcophyton sp.(XW-4)的次級代謝產(chǎn)物進行了分離鑒定。運用正相硅膠柱層析、ODS硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、半制備HPLC等分離手段,NMR,MS,UV,IR等現(xiàn)代波譜技術,分離得到了7個單體化合物,鑒定為7個西松烷二萜類的結(jié)構(gòu),分別為化合物1,(-

3、)-marasol(2),(+)-11,12-epoxy-11,12-dihydrocembrene-C(3),(+)-11,12-epoxysarcophytol A(4),sarcophytol-B(5),(1Z,3E,7E,11Z)-19-hydroxy-cembra-1,3,7,11-tetraen-10,20-1actone(6),(2.E,7E)-4,11-dihydroxy-1,12-oxidocembra-2,7-die

4、n(7),其中,化合物1為新化合物。文獻調(diào)研表明,化合物2,4-7僅從軟珊瑚科Alcyoniidae中被發(fā)現(xiàn),而且化合物2,6僅從肉芝軟珊瑚屬Sarcophyton中被發(fā)現(xiàn),因此這些西松烷二萜類化合物具有化學分類學意義。萜類作為Sarcophyton屬軟珊瑚含量最多、種類最豐富的結(jié)構(gòu)類型,大多具有較強的生物活性。
　　從枝網(wǎng)刺柳珊瑚共附生隔孢伏革菌屬真菌Peniophora sp.(ZJ-XS-2009001)中分離得到了12個單

5、體化合物,鑒定為7個甾體類和1個二聯(lián)苯醚類結(jié)構(gòu),分別為化合物4-hydroxy-17R-methylincisterol(8),麥角甾醇(9),表甾醇(10),麥角甾-7,22-二烯-3β-醇(11),(3β,5α,6β,22E)-6-甲氧基麥角甾-7,22-二烯-3,5-二醇(12),酒酵母甾醇(13),(3β,5α,6α,7P,22E)-5,6-環(huán)氧麥角甾-8,22-二烯-3,7-二醇(14),(3β,5α,6α,7α,22E)-5

6、,6-環(huán)氧麥角甾-8(14),22-二烯-3,7-二醇(15),麥角甾-4,6,8,22-四烯-3-酮(16),過氧化麥角甾醇(17),9(11)-脫氫過氧化麥角甾醇(18),penicillide(19)?；衔?,12-19為首次從Peniophora sp.中分離得到,其中化合物8,12和16為首次從珊瑚共附生真菌中分離得到。甾體類化合物也是枝網(wǎng)刺柳珊瑚屬主要的次級代謝產(chǎn)物,具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化等多種生物活性,表明共附生真菌可

7、能參與了宿主甾體類化合物的生物合成。
　　運用斑馬魚(Danio rerio)魚毒微量模型,結(jié)合鹵蟲(Artemia salina)致死、抗藤壺(Balanus amphitrite)幼蟲附著、抗菌(Bacillus subtilis,Bacillus cereus,Staphylococcus aureus,Micrococcus tetragenus等9種細菌)等活性模型,對化合物進行了活性評價。結(jié)果顯示,化合物12,13和1

8、9顯示了強的斑馬魚胚胎毒性,化合物12對斑馬魚胚胎致死毒性的Ecso值為16.34μg·mL-1(24 h);化合物13對斑馬魚胚胎脊索畸形毒性的EC50值為7.83μg·mL-1(72 h),胚胎致死毒性的EC50值為10.22μg·mL-1(24 h)?；衔?對蠟狀芽胞桿菌β.cereus表現(xiàn)出中等強度的抗菌活性,化合物4和6對枯草芽胞桿菌B.subtilis、金黃色葡萄球菌S.aureus、四聯(lián)桿菌M.tetragenus表現(xiàn)出

9、弱的抗菌活性;化合物6有較強的抗藤壺輔佐活性;化合物8顯示出較強的鹵蟲致死活性。
　　采用斑馬魚毒性微量模型對115個珊瑚及其共附生微生物等來源的次級代謝產(chǎn)物進行了活性和毒性的評價,構(gòu)效關系分析表明,聯(lián)苯醚類、異香豆素類化合物的斑馬魚魚毒活性較為顯著,具有明顯的致畸和致死效應,Ecso值大多集中在3～15μg·mL-1,羥基的存在對活性有重要貢獻;部分葸醌類化合物也表現(xiàn)出了較強的魚毒活性,卵凝結(jié)和脊索畸形活性效應突出,可能是C-2