縫隙連接蛋白43在低切應(yīng)力誘導(dǎo)小鼠頸總動脈重建中的作用及其機制.pdf

1、血管重建（remodeling)是指機體在生長、發(fā)育、衰老和疾病過程中,血管為適應(yīng)體內(nèi)外環(huán)境的變化而發(fā)生的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的改變。在正常切應(yīng)力條件下，血管重建處于一個動態(tài)平衡狀態(tài)。而低切應(yīng)力誘導(dǎo)血管發(fā)生病理性重建，從而導(dǎo)致動脈粥樣硬化、高血壓和血管再狹窄等心血管疾病。在血管重建過程中，縫隙連接蛋白（connexin，Cx）起到重要的作用，它們介導(dǎo)同源和異源血管細胞間的通訊，與血管細胞的生長、凋亡、遷移和炎癥反應(yīng)等關(guān)系密切。因此，研究低切應(yīng)

2、力條件下血管細胞的Cx表達和調(diào)控機制具有重要的理論和實際意義。
　　本文通過結(jié)扎頸外動脈和頸內(nèi)動脈，構(gòu)建了FVB/NJ小鼠頸總動脈低血流模型;以 HE染色的血管組織切片測量血管幾何形態(tài)學(xué)變化； Western blotting和Real-Time PCR分別檢測血管組織 Cx43和miR-206的表達變化。然后，用血小板源性生長因子（PDGF-BB，25 ng/ml）刺激體外培養(yǎng)的大鼠 VSMCs，以模擬低切應(yīng)力刺激；Transw

3、ell技術(shù)檢測細胞遷移的變化，同時檢測 PDGF-BB對VSMCs的Cx43和miR-206表達的影響，進而使用miR-206 siRNA對培養(yǎng)的VSMCs進行 RNA干擾，以探討 miR-206是否調(diào)控 PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的遷移和Cx43的表達。最后，用Cx43 siRNA對培養(yǎng)的VSMCs進行 RNA干擾，以探討 Cx43在PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移中的作用。
　　結(jié)果顯示：①小鼠右頸總動脈部分分支結(jié)扎導(dǎo)致

4、右頸總動脈血流量降低約90％，平均切應(yīng)力降低約70%；低切應(yīng)力可以誘導(dǎo)小鼠頸總動脈內(nèi)膜新生，血管壁厚/內(nèi)徑比和內(nèi)膜/中膜面積比均顯著增高，同時又上調(diào) Cx43的表達和下調(diào) miR-206的表達；②重組PDGF-BB可以顯著促進 VSMCs遷移，上調(diào) Cx43的表達并抑制miR-206的表達；③干擾 miR-206上調(diào) Cx43的表達，明顯增強PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移；④干擾 Cx43明顯抑制了PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移