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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雜色曲霉素對(duì)體外培養(yǎng)GES1細(xì)胞CyclinB1、Cdc2和Cdc25C表達(dá)影響的研究姓名:王娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:張祥宏邢凌霄20090301中文摘要階段。真核細(xì)胞中,G2M進(jìn)程由細(xì)胞周期蛋白B(CyclinB)Cdc2復(fù)合物調(diào)控。CyelinB1/Cdc2是由Cdc25C激活從而促進(jìn)細(xì)胞從G2期進(jìn)入M期,Cdc25C的活性是細(xì)胞周期進(jìn)入M期的關(guān)鍵之一。因此,在前期研究的基礎(chǔ)之上
2、,本實(shí)驗(yàn)研究了ST對(duì)體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞的CyclinBl、Cdc2、Cdc25C表達(dá)的影響,以期探討G2期阻滯的相關(guān)分子的變化在ST誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞G2期阻滯中的意義。方法:1細(xì)胞培養(yǎng)與處理GES1細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清、105U/L青霉素、100mg/L鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中,37℃、5%C02培養(yǎng),細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞(傳代后24h)隨機(jī)分為空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組給予DMSO溶解、生理鹽水稀
3、釋的ST,使其終濃度分別為100、500、1000、200099/L,對(duì)照組給予等體積生理鹽水,溶劑對(duì)照組給予等體積DMSO溶液,繼續(xù)培養(yǎng)24h收集細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。2蛋白免疫印跡(WesternBlotting)提取細(xì)胞總蛋白,用蛋白免疫印跡方法,檢測(cè)ST處理后人胃黏膜上皮細(xì)胞GES1中CyclinBl、Cdc2/磷酸化型Cdc2和Cdc25C/j磷酸化型Cdc25C的表達(dá)情況。3細(xì)胞總RNA的提取、鑒定及定量采用異硫氰酸胍一步法
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