Monacolin K高產(chǎn)菌株選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化研究.pdf

1、隨著人們生活水平的不斷提高，冠心病和動脈硬化等心腦疾病對人類健康的危害日益加劇。醫(yī)學研究表明，高膽固醇血癥可能是冠心病和動脈硬化的重要原因之一。在人體內(nèi)，膽固醇是在肝臟里合成的，又在肝臟里被轉(zhuǎn)化成膽酸，如果能夠抑制肝臟內(nèi)源性膽固醇的生物合成，就一定會降低血液內(nèi)膽固醇的濃度，從而治療高膽固醇血癥，防止或緩解動脈硬化和冠心病的發(fā)生。1979年日本學者遠藤章從紅曲霉(Monascusruber)的培養(yǎng)液中獲得一種次級代謝產(chǎn)物，這是一種新的膽固

2、醇合成抑制劑-MonacolinK。目前MonacolinK是各國公認的降低膽固醇的理想藥劑，具有高效、低毒、安全的特點。但是，MonacolinK在紅曲霉的發(fā)酵液中產(chǎn)率非常低，目前國內(nèi)外的研究重點都集中于提高MonacolinK的產(chǎn)率，降低生產(chǎn)成本。本項研究的主要目的是通過誘變育種篩選出MonacolinK高產(chǎn)菌株，并對其發(fā)酵條件和培養(yǎng)基配方進行優(yōu)化，以提高MonacolinK的產(chǎn)率，降低生產(chǎn)成本。 活化保藏菌種，選擇誘變出發(fā)

3、菌株，測其MonacolinK的產(chǎn)率為2.86mg/L。然后利用紫外線誘變的方法對其孢子進行誘變處理，通過初篩、復篩，得到5株產(chǎn)率較高的突變株。分別對這5株高產(chǎn)菌株進行遺傳穩(wěn)定性試驗，確定菌株T2為高產(chǎn)突變株。其MonacolinK產(chǎn)率為5.40mg/L，是出發(fā)菌株的1.89倍。 通過對菌株T2的生物學特性進行研究，確定搖瓶培養(yǎng)的發(fā)酵周期為12d，其耐乙醇度小于15％。 對高產(chǎn)菌株T2發(fā)酵培養(yǎng)基配方進行單因素試驗，按單因

4、素試驗結(jié)果選擇甘油、混合氮源、MgSO4·7H2O、KH2PO4四個因素進行正交試驗，確定這四個因素對MonacolinK產(chǎn)率影響的顯著性，并確定菌株T2的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：甘油5.0％、混合氮源(牛肉膏2.2g+NaNO30.8g)、KH2PO40.10％、MgSO4·7H2O0.10％、KCl0.06％、FeSO4·7H2O0.001％。 對高產(chǎn)菌株T2的發(fā)酵條件進行單因素試驗，按單因素試驗結(jié)果選擇初始pH、培養(yǎng)溫度、接