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1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文高產(chǎn)谷胱甘肽酵母菌株選育及培養(yǎng)條件研究姓名:陳儉梅申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):食品科學(xué)指導(dǎo)教師:劉代成袁建國20090402山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文過對UCl搖瓶培養(yǎng)條件的考察得到較優(yōu)培養(yǎng)條件。三、研究結(jié)果1、得到乙醇抽提優(yōu)化條件:溫度為50℃,反應(yīng)時間90min,乙醇濃度為40%。提取條件優(yōu)化后谷胱甘肽產(chǎn)量為751mg/L,比優(yōu)化前提高了373%。2、確定合適的碳源為工業(yè)用葡萄糖,有機氮源為酵母粉,無機氮源為(NH
2、4)2S04,磷酸鹽為KH2P04和K2HP04。正交試驗確定的最佳培養(yǎng)基組成(g/L)葡萄糖25,酵母粉10,(rrrt425043,K2HP0412,KH2P0418;考察了不同的無機鹽的影響,確定在培養(yǎng)基里添加O3g/L的MgS04。培養(yǎng)基條件優(yōu)化后酵母菌株的谷胱甘肽產(chǎn)量為96mg/L,比優(yōu)化前提高了278%。3、最終得到一株高產(chǎn)谷胱甘肽菌株UCl,谷胱甘肽產(chǎn)量為1694mg/L,比優(yōu)化后菌株CI提高了765%。并獲得胞內(nèi)谷胱甘肽
3、含量較高的標(biāo)記性酵母菌株Z5(高濃度氯化鋅培養(yǎng)平板中產(chǎn)生透明圈,ZnCl2r)和C4(淡黃色,Ethr)。其中z5谷胱甘肽產(chǎn)量為121mg/L,比出發(fā)菌株CI優(yōu)化后提高了26%。C4谷胱甘肽產(chǎn)量為127mg/L,比出發(fā)菌株CI優(yōu)化后提高了323%。對標(biāo)記性的兩親株z5和C4進行單親滅活融合。摸索了原生質(zhì)體制備和再生的條件及融合條件,經(jīng)過篩選、鑒定得到融合子R54,其生物量為1049/L,谷胱甘肽產(chǎn)量為157。2mg/L。谷胱甘肽產(chǎn)量比兩
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