強(qiáng)制性上肢訓(xùn)練對(duì)腦卒中康復(fù)期的線栓模型SD大鼠的影響機(jī)制.pdf

1、目的：比較改良手術(shù)法與傳統(tǒng)手術(shù)法制備康復(fù)期缺血性腦卒中大鼠模型的可靠性；探討強(qiáng)制性使用運(yùn)動(dòng)療法(CIMT)作為一種新的運(yùn)動(dòng)療法對(duì)腦梗死大鼠腦功能恢復(fù)的作用機(jī)制，為康復(fù)訓(xùn)練改善腦梗死患者神經(jīng)功能的機(jī)制提供理論依據(jù)。 材料和方法：(1)隨機(jī)將雌性SD大鼠173只分為傳統(tǒng)手術(shù)組(n=63)及改良手術(shù)組(n=109)，傳統(tǒng)手術(shù)組行將線栓自頸外動(dòng)脈(ECA)插入結(jié)扎ECA和翼腭動(dòng)脈(PPA)，改良手術(shù)組線栓則從頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)插入，只結(jié)

2、扎頸總動(dòng)脈(CCA)。 (2)兩種手術(shù)方法共制備大腦中動(dòng)脈閉塞康復(fù)期模型共79只，隨機(jī)分成三組：模型自然恢復(fù)(Nature Recovery，NR)組20只和模型強(qiáng)制訓(xùn)練(CIMT)組30只，常規(guī)訓(xùn)練(Routine Train，RT)組29只；另設(shè)假手術(shù)(ShamGroup，SG)3組36只，術(shù)式與模型制備相同，但不下線栓。 (3)CIMT組和RT組從術(shù)后第三天生命體征平穩(wěn)開(kāi)始訓(xùn)練。強(qiáng)迫性功能訓(xùn)練組：固定健側(cè)上肢，強(qiáng)迫患側(cè)肢體進(jìn)行滾筒

3、、平衡木、網(wǎng)屏訓(xùn)練，每天訓(xùn)練時(shí)間上下午各15min；常規(guī)訓(xùn)練組：不限制健側(cè)上肢進(jìn)行滾筒、平衡木、網(wǎng)屏訓(xùn)練，訓(xùn)練時(shí)間與CIMT相同；自然恢復(fù)組則不給予任何訓(xùn)練；30d后訓(xùn)練停止，各組大鼠飼養(yǎng)條件相同。(4)術(shù)后5d、10d、15d、30d、60d分別各組進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，60d每組取5只大鼠從核磁影像學(xué)、HE染色、髓鞘染色、電鏡、順行和逆行示蹤等六個(gè)方面，進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)、陽(yáng)性細(xì)胞技術(shù)、病理分析觀察。

4、 結(jié)果： (1)本實(shí)驗(yàn)采用的改良手術(shù)組與傳統(tǒng)手術(shù)組相比術(shù)后神經(jīng)功能評(píng)分無(wú)顯著差別，在手術(shù)室時(shí)間上明顯縮短(P<0.01)，在術(shù)后存活時(shí)間上有顯著延長(zhǎng)(P<0.01)，兩個(gè)月存活比例分別為：改良手術(shù)組54.13％(n=109)，傳統(tǒng)手術(shù)組31.75％(n=63)。 (2)平衡木和網(wǎng)屏測(cè)評(píng)顯示在第10dCIMT組恢復(fù)最好(P<0.05)，在第15d、30d均優(yōu)于RT組，在停訓(xùn)練一個(gè)月的第60d肢體康復(fù)優(yōu)勢(shì)仍然存在(P<

5、0.05)；另外，10dCIMT組網(wǎng)屏抓握能力恢復(fù)正常水平，但RT組和NR組分別為1.21±0.46和1.57±0.41。 (3)脊髓HE染色CIMT組部分神經(jīng)束較N R組、RT組增粗，但細(xì)胞數(shù)(85.55±7.80)未見(jiàn)明顯增多；CIMT組左側(cè)大腦腳神經(jīng)纖維明顯較RT組增粗和變密；左側(cè)海馬CAl區(qū)CIMT組錐體細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯比NR組、RT組多(P<0.05)。 (4)右側(cè)頸部脊髓后索固綠髓鞘染色CIMT組較NR組、RT

6、組髓鞘染色分布明顯增多，呈均勻深綠色，有核細(xì)胞均勻分布；左側(cè)大腦腳CIMT組與RT組相比較細(xì)的神經(jīng)傳導(dǎo)束更為雜亂，相互交織，團(tuán)簇狀神經(jīng)傳導(dǎo)束及有核細(xì)胞分布顯著增多。 (5)順行和逆行示蹤劑顯示在大腦腳走行的示蹤劑CIMT組與RT組比較無(wú)顯著差別；在左側(cè)紋狀體CIMT組示蹤劑的分布較NR組、RT組分部多。 (6)腦缺血10d時(shí)CIMT組和RT組的GFA鄧日性細(xì)胞數(shù)與NR組相比有明顯差別(P<0.05)；CIMT組、RT組的

7、GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比NR組有明顯增多(P<0.05)。腦缺血30d時(shí)，GFAP陽(yáng)性細(xì)胞仍大量存在，較15d略有減少，比NR組有明顯增多(P<0.05)。即使訓(xùn)練結(jié)束后的60d，GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在CIMT組比RT組陽(yáng)性細(xì)胞多(P<0.05)。 (7)核磁波譜學(xué)檢查CIMT組大腦腳左右對(duì)比，大小對(duì)稱，形態(tài)相似，環(huán)池未見(jiàn)明顯增寬，較RT組左大腦腳面積萎縮不明顯(P=0.015，<0.05)。 (8)左側(cè)大腦腳電鏡成像檢查CI

8、MT組有新的厚髓神經(jīng)纖維形成，其內(nèi)可見(jiàn)旺盛的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；左側(cè)海馬區(qū)電鏡顯示CIMT組分布著較粗的有髓神經(jīng)纖維，其內(nèi)可見(jiàn)旺盛的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，較大的突觸，突觸前膜有許多粗大的突觸小泡，并可見(jiàn)新生突觸。 結(jié)論 (1)從核磁波譜學(xué)、組織學(xué)、免疫組化的結(jié)果可以證明我們對(duì)MCAO模型的改進(jìn)是成功的，改良手術(shù)法制備缺血性腦卒中模型不但確切可靠而且較傳統(tǒng)手術(shù)法節(jié)省手術(shù)時(shí)間、提高模型存活率。 (2)CIMT比常規(guī)訓(xùn)練法更能夠改善大鼠的肢體運(yùn)

9、動(dòng)功能，它的訓(xùn)練效果在康復(fù)訓(xùn)練期間可以看到，療效在停止訓(xùn)練1個(gè)月后依然存在。 (3)CIMT比常規(guī)訓(xùn)練更能夠促使梗塞灶周圍的星形細(xì)胞增殖。 (4)常規(guī)訓(xùn)練不能阻止腦缺血性梗塞灶引起的遠(yuǎn)隔區(qū)域組織萎縮，但是CIMT明顯減少此現(xiàn)象。 (5)從逆行神經(jīng)示蹤看到，CIMT能夠促進(jìn)示蹤劑向患側(cè)梗死灶周圍的物質(zhì)運(yùn)輸，其效果明顯強(qiáng)于常規(guī)訓(xùn)練；CIMT促進(jìn)跨突觸傳遞，調(diào)節(jié)突觸作用和塑造新皮質(zhì)，促進(jìn)突觸的功能重整、潛在突觸的啟用和