B7-H4在實驗性自身免疫性心肌炎小鼠中的表達及B7-H4-Fc融合蛋白的治療作用.pdf

1、目的:
　　本實驗擬建立小鼠實驗性自身免疫性心肌炎(EAM)模型，通過對小鼠血液、脾淋巴細胞、心肌等組織的檢測，研究B7-H4在實驗性自身免疫性心肌炎小鼠病程中表達情況，并觀察B7-H4-Fc融合蛋白對實驗性自身免疫性心肌炎的治療作用，以期為心肌炎發(fā)病機制的研究提供一種新的研究方向，并為臨床治療心肌炎提供一種新的治療措施。
　　方法:
　　將120只BALB/c小鼠隨機分為對照組（24只），實驗組（48只）與治療組（4

2、8只）。給實驗組與治療組小鼠注射豬心肌肌凝蛋白（200ug/只），并于實驗第一天開始給予治療組小鼠B7-H4-Fc融合蛋白(3.75mg/kg)，每周一次;對照組給予同體積不含肌凝蛋白的完全弗氏佐劑及PBS。在實驗的第14、21、30、45天分批處死小鼠，血液離心后收集血清進行ELISA檢測抗體滴度，無菌取脾臟進行淋巴細胞增殖實驗，一部分心肌用甲醛固定，脫水制蠟塊后切片，進行HE染色及免疫組織化學染色，另一部分凍存于-80℃冰箱中，之后

3、進行實時熒光定量PCR（real-timePCR）。
　　結果:
　　實驗組小鼠心肌HE染色結果顯示，心肌炎癥改變在第21、30天時最嚴重，之后逐漸降低;ELISA檢測抗體滴度、淋巴細胞增殖實驗與real-timePCR的結果與心肌炎癥情況類似，在實驗期間隨炎癥情況變化，但較對照組均增高;免疫組化結果顯示B7-H4蛋白在心肌炎的心肌血管內皮恒定表達，不隨心肌炎病情變化而變化。治療組小鼠心肌HE染色結果顯示，心肌炎癥較實驗組減