河北省麻疹病毒抗原變異及人群麻疹免疫水平研究.pdf

1、目的:了解河北省循環(huán)的麻疹野病毒抗原變異情況和河北省健康人群的麻疹I(lǐng)gG抗體水平，以評(píng)估疫苗接種成效和人群免疫情況;研究健康人群血清和麻疹病人血清分別中和麻疹疫苗株和流行野毒株的效果之間的差異，掌握現(xiàn)有的麻疹疫苗的保護(hù)效果，為河北省制定消除麻疹的策略和措施提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　1、人群抗體水平監(jiān)測(cè):依照分層隨機(jī)抽樣的方法抽取健康人群，并選用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì)健康人群的麻疹I(lǐng)gG抗體水平進(jìn)行檢測(cè)。

2、>　　2、病毒分離和鑒定:①標(biāo)本采集:從麻疹患者身上采集咽拭子標(biāo)本;②病毒分離:選用Vero/slam細(xì)胞按世界衛(wèi)生組織規(guī)定的方法進(jìn)行麻疹病毒分離;③病毒鑒定:通過間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)鑒定分離出的是否為麻疹病毒。
　　3、病毒擴(kuò)增和50％組織細(xì)胞感染量(50％ Tissue culture infective dose，TCID50)測(cè)定:取適量的Vero/slam細(xì)胞，將病毒接種到細(xì)胞上，待細(xì)胞出現(xiàn)的病變效應(yīng)（Cytopathic

3、Effect，CPE）達(dá)到75％以上時(shí)收獲，-70℃凍融三次，-70℃保存?zhèn)溆谩０凑铡队?jì)劃免疫技術(shù)管理規(guī)程》中介紹的麻疹減毒活疫苗效力試驗(yàn)說明進(jìn)行操作，隨后對(duì)病毒的TCID50進(jìn)行測(cè)定。
　　4、中和實(shí)驗(yàn):在中和實(shí)驗(yàn)中，選取隨機(jī)區(qū)組方法進(jìn)行設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)方法參照《醫(yī)學(xué)病毒學(xué)基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)技術(shù)》一書中的技術(shù)指南，使用健康人群血清和麻疹病人血清分別去中和麻疹疫苗株和兩株麻疹野毒株，本次實(shí)驗(yàn)所選取的兩株麻疹野病毒均系近期在我省分離得到的病毒，對(duì)

4、各自的中和抗體滴度分別計(jì)算，比較選取的各個(gè)毒株在中和抗體滴度上是否存在差異，了解目前使用的麻疹疫苗免疫效力。
　　結(jié)果:
　　1、人群抗體水平:在本次實(shí)驗(yàn)所檢測(cè)的556份血清標(biāo)本中，麻疹I(lǐng)gG抗體陽(yáng)性率平均為92.63％，幾何抗體平均滴度(GMT)為1050.69。
　　2、病毒鑒定:通過間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)鑒定，本實(shí)驗(yàn)研究所使用的兩株野毒株均為麻疹病毒:Hebei12-03和Hebei12-04。
　　3、中和實(shí)驗(yàn)

5、:選取40份麻疹患者血清，用其分別去中和麻疹分離株和疫苗株（S191，下同），其中和抗體GMT值分別為Hebei12-031:59.66、Hebei12-041:59.45、S1911:60.32，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P＞0.05）;將40份健康人群血清，分別中和兩株河北毒株和疫苗株，其抗體GMT值分別為Hebei12-031:56.58、Hebei12-041:56.90、S1911:70.09，抗體滴度有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05）。