微米中藥功能襯材對(duì)家兔骨折愈合的影響.pdf

1、[背景]
　　 骨折是臨床上的常見(jiàn)病多發(fā)病,骨折愈合是一個(gè)極其復(fù)雜的骨組織再生修復(fù)過(guò)程,受到全身和局部許多因素的影響和調(diào)節(jié)。約5％～10％的骨折由于各種因?yàn)榘l(fā)生延遲愈合或不愈合,嚴(yán)重影響人們的生存質(zhì)量。如何加速骨折愈合,提高愈合質(zhì)量一直是醫(yī)學(xué)界共同關(guān)注的重大課題之一。
　　 中藥外治法是指運(yùn)用非口服藥物刺激經(jīng)絡(luò)、穴位、皮膚、粘膜、肌肉、筋骨等以達(dá)到防病治病目的的一種傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)療法。中藥外治法治療骨折,歷史悠久,療效顯著。目

2、前已被研究證實(shí)的作用機(jī)制主要有如下幾方面:改善血液循環(huán)；促進(jìn)血腫的吸收和機(jī)化；增加膠原的合成；促進(jìn)鈣鹽沉積；增加細(xì)胞數(shù)量、促進(jìn)細(xì)胞活性；調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)；促進(jìn)骨痂生成,提高骨痂質(zhì)量；干預(yù)骨形成調(diào)節(jié)因子的作用；提高微量元素的含量等。
　　 伴隨著科技的發(fā)展,皮膚給藥已成為第三大給藥途徑,中醫(yī)在這個(gè)領(lǐng)域可謂獨(dú)具特色,中藥外治的優(yōu)勢(shì)在于；藥物的作用力直接、集中,能直達(dá)病所,使其病變局部?jī)?nèi)的藥物濃度顯著高于血藥濃度,故發(fā)揮作用充分,奏效迅

3、捷。且所用藥量和副反應(yīng)遠(yuǎn)小于內(nèi)服藥。將傳統(tǒng)中醫(yī)外治與現(xiàn)代透皮技術(shù)結(jié)合,形成中藥透皮治療系統(tǒng)必將是今后中藥外治研究的發(fā)展趨勢(shì)。
　　 目前中藥外治骨折的劑型主要有中藥加工制成的膏劑、酊劑和現(xiàn)代氣壓罐裝的噴霧劑等,文獻(xiàn)已有報(bào)道,但均各自有其不足和局限性。如何選用有效的方藥和采用科學(xué)合理的劑型治療骨折,是中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展的趨勢(shì)。本課題運(yùn)用目前中藥現(xiàn)代化最前沿的創(chuàng)新成果-微納米中藥技術(shù),將中藥驗(yàn)方微米化并與紡織工業(yè)重整技術(shù)結(jié)合,制作成一

4、種新型醫(yī)用材料-微米中藥功能襯材。目的是把復(fù)位、固定和局部用藥有機(jī)地結(jié)合起來(lái),除了作為石膏繃帶或小夾板固定時(shí)的內(nèi)層襯墊使用外,還具有消炎鎮(zhèn)痛,減輕創(chuàng)傷反應(yīng),加快組織的修復(fù),加速骨折愈合及功能恢復(fù)的作用。
　　 微米中藥是指采用現(xiàn)代高科技與傳統(tǒng)炮制技術(shù)和制劑技術(shù)相結(jié)合而研制的能保持傳統(tǒng)中藥固有藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的粒度為微米級(jí)(平均直徑≤15 μm)的新型中藥。它是中藥微米化后的產(chǎn)物,不是一種新的藥種。微米中藥可大幅度提高藥物的活性和生

5、物利用度,降低用藥量,減少毒副作用,與中藥現(xiàn)代化的核心“安全、有效、可控、穩(wěn)定”息息相關(guān)。利用超微粉碎技術(shù)制備的中藥微米顆粒,既能保持中藥的有效成分不被破壞,同時(shí)由于制得的顆粒比表面積增大,能有效增進(jìn)藥物有效成分的溶出,提高藥物的生物利用度；其次它可以提高藥物的靶向性,有助于控制藥物在體內(nèi)的分布等；本研究產(chǎn)品-微米中藥功能襯材,既便于給藥劑量的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,同時(shí)又便于制劑生產(chǎn)工藝、質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化。這種新型的醫(yī)用功能復(fù)合材料可

6、作為石膏繃帶或小夾板固定時(shí)的內(nèi)層襯材使用,使骨折在外固定的基礎(chǔ)上,與局部用藥有機(jī)結(jié)合,將有效地促進(jìn)骨折愈合及功能的恢復(fù)。本實(shí)驗(yàn)將從血清生化指標(biāo)、血液流變學(xué)指標(biāo)、X線及組織形態(tài)學(xué)四個(gè)方面探討微米中藥功能襯材對(duì)家兔骨折愈合的影響。
　　 [目的]
　　 研究微米中藥功能襯材對(duì)家兔骨折愈合的影響,為其臨床應(yīng)用和成果轉(zhuǎn)化提供依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.實(shí)驗(yàn)分組和模型制作:24只普通級(jí)雄性新西蘭兔隨機(jī)分為4組

7、:微米組、中藥對(duì)照組、襯材對(duì)照組和模型對(duì)照組,每組6只。參照柴本甫造模方法,將全部家兔造成右側(cè)橈骨中段骨缺損骨折模型。
　　 2.襯材制作:利用高能球磨法制備微米三七粉,加入冰片等其它藥物,結(jié)合紡織工業(yè)的重整技術(shù)制作出微米中藥功能襯材。
　　 3.處理方式:所有家兔均造模成功,微米組給予外敷微米中藥功能襯材后加石膏外固定,中藥對(duì)照組給予外敷普通中藥功能襯材后加石膏外固定,襯材對(duì)照組給予外敷普通襯材(無(wú)中藥)后加石膏外固定

8、,模型對(duì)照組不予任何治療。每周換1 次襯材,連續(xù)觀察6周。
　　 4.指標(biāo)檢測(cè)方式:三七粉微米化前后在掃描電鏡下行粒徑對(duì)比；于造模前和造模后第 2,4,6 周行血清堿性磷酸酶活性,血鈣、血磷濃度及血液流變學(xué)指標(biāo)(全血高切、中切、低切粘度及血漿粘度)的檢測(cè)；造模后第2,4,6周各組X射線下觀察骨折愈合情況,并行外骨痂和骨痂線模糊程度評(píng)分；造模后第 6 周末將所有家兔處死,以骨折斷端為中心0.5cm 為取樣部位,行脫鈣固定、脫水及石

9、蠟包埋后,連續(xù)切片,行蘇木精-伊紅染色(HE 染色),光學(xué)顯微鏡下觀察骨折區(qū)修復(fù)情況。
　　 [統(tǒng)計(jì)學(xué)方法]
　　 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。采用 SPSS13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。多組間計(jì)量資料比較使用單因素方差分析(one-way ANOVA 方法),組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)的血清堿性磷酸酶活性、血鈣、血磷濃度、血液流變學(xué)指標(biāo)(全血高切、中切、低切粘度及血漿粘度)及外骨痂和骨痂線模糊程度評(píng)分比較采用重復(fù)測(cè)

10、量的方差分析。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) α定為0.05。
　　 [結(jié)果]
　　 1.血清生化指標(biāo)檢測(cè):結(jié)果顯示組間家兔的血清堿性磷酸酶活性、血鈣含量、血磷含量在骨折愈合過(guò)程的不同時(shí)間點(diǎn)中均存在顯著差異(F 值分別為3.147,3.427和6.452,P 值分別為0.048,0.037和0.003),造模后第2周微米組血清堿性磷酸酶活性值達(dá)到高峰,和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P值分別為 0.001,0.000)；微米組血鈣

11、含量和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P 值分別為0.001,0.002)；4組動(dòng)物血磷值均有所降低,微米組血磷含量和模型對(duì)照組比較存在顯著差異(P=0.042)。造模后第4周各組血鈣含量開(kāi)始下降,其中微米組下降較多,和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P 值均為 0.000)；血磷值開(kāi)始升高,其中微米組尤為明顯,微米組和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P 值分別為0.002,0.048)。造模后第6周微米組

12、血清堿性磷酸酶活性及血鈣含量均降至正常值附近,微米組血清堿性磷酸酶活性及血鈣含量和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P<0.05)；4組動(dòng)物血磷均持續(xù)在較高水平,微米組和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.014)。同一時(shí)間點(diǎn)襯材對(duì)照組所有血清生化指標(biāo)和模型對(duì)照組比較均無(wú)顯著差異(P>0.05)。
　　 2.血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè):微米組幾乎所有指標(biāo)均低于對(duì)照組,第2周時(shí)微米組全血低切粘度、

13、全血高切粘度及血漿粘度和模型對(duì)照組相比存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.017,0.000)；第4周時(shí)微米組四個(gè)指標(biāo)和模型對(duì)照組相比存在顯著差異(P =0.000),微米組全血低切粘度、血漿粘度與中藥對(duì)照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.001)；第6周時(shí)微米組四個(gè)指標(biāo)和模型對(duì)照組相比存在顯著差異(P =0.000),微米組全血低切粘度、血漿粘度與中藥對(duì)照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.001,0.036

14、)。
　　 3.X 射線檢查及外骨痂和骨折線模糊程度評(píng)分:造模后第6周顯示微米組外骨痂接近完全吸收,骨折處皮質(zhì)骨密度接近正常皮質(zhì)骨,骨髓腔完全再通；中藥對(duì)照組骨折線消失,外骨痂開(kāi)始吸收,骨髓腔仍未通；模型對(duì)照組中有出現(xiàn)斷端硬化不愈合現(xiàn)象。外骨痂和骨折線模糊程度評(píng)分結(jié)果顯示造模后第 2 周時(shí)襯材對(duì)照組和模型對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P=0.819),微米組和模型對(duì)照組比較存在顯著差異(P=0.001)；造模后第4周時(shí)襯材對(duì)照組和模型對(duì)

15、照組比較無(wú)顯著差異(P=0.778),微米組和模型對(duì)照組比較存在顯著差異(P=0.000),微米組與中藥對(duì)照組比較存在顯著差異(P=0.010)；造模后第6周時(shí)襯材對(duì)照組和模型對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P=0.293),微米組和模型對(duì)照組、中藥對(duì)照組比較均存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.027)。
　　 4.組織形態(tài)學(xué):造模后第6周時(shí),微米組骨折端小梁間血管擴(kuò)張,數(shù)目較多,軟骨內(nèi)成骨完成,可見(jiàn)大量成骨細(xì)胞,編織骨開(kāi)始塑形