新冠心蘇合活血方對大鼠離體心臟及血管變力作用的研究.pdf

1、冠心病心絞痛是冠狀動脈供血不足,心肌急劇的、暫時缺血與缺氧所引起的以發(fā)作性胸痛或胸部不適為主要表現(xiàn)的臨床綜合癥。新冠心蘇合活血方遵循中醫(yī)理論,選用蘇合香、冰片、乳香、檀香四藥組成,具有芳香開竅、活血止痛作用,常用治冠心病心絞痛急性發(fā)作。
　　 課題組前期針新冠心蘇合活血方的藥效學(xué),分別對采用Pit或ISO復(fù)制的小鼠、大鼠實驗性急性心肌缺血模型進行相關(guān)的實驗研究。結(jié)果顯示該方對Pit或ISO導(dǎo)致的大鼠/小鼠實驗性急性心肌缺血模型均

2、有較好的保護作用,其機制可能與抑制自由基的脂質(zhì)過氧化,保護和改善內(nèi)皮功能,舒張冠脈血管等有關(guān)。同時,實驗結(jié)果顯示,新冠心蘇合活血方能明顯降低異ISO所致的心電圖J點和P波的改變,縮小心肌缺血范圍有較好的抗心肌缺血作用;能明顯降低血清GOT活性(P＜0.05,P＜0.01),減輕膜損傷,保護膜結(jié)構(gòu)和心肌細胞,抑制心肌酶外漏;能使心肌SOD活性明顯升高,MDA含量明顯降低,以減輕脂質(zhì)過氧化損傷,防止心肌細胞壞死,從而發(fā)揮抗心肌缺血損傷的作用

3、。新冠心蘇合活血方還能使血清NO含量顯著升高,有效保護和改善內(nèi)皮功能,促進NO的產(chǎn)生與釋放,舒張血管而發(fā)揮抗心肌缺血作用。新冠心蘇合活血方能明顯降低ISO復(fù)制的心肌缺血模型大鼠血清GOT含量,提高心肌勻漿組織中NO含量、NO活性,降低MDA含量,對實驗性急性心肌缺血有一定的保護作用。
　　 鑒于前期研究情況,本實驗著重觀察新冠心蘇合活血方對動物離體心臟、血管變力作用。分別選用離體大鼠、小鼠、家兔等心臟、胸、腹主動血管進行實驗,目

4、的在于研究該藥對心臟、血管的直接作用。而離體心臟標(biāo)本的復(fù)制方法較成熟,且穩(wěn)定性好,不受心率、動脈血管收縮、擴張和神經(jīng)體液調(diào)節(jié)等因素的影響;觀察心肌收縮性能的改變較完整心臟更簡便,適合觀察藥物對心臟的直接作用。心肌收縮力大小不僅受心肌前后負(fù)荷的影響,還受Ca濃度、葡萄糖、脂肪酸代謝等心肌細胞自身代謝活動的影響,心功能的決定因素有前負(fù)荷、后負(fù)荷、心肌收縮力、心率,離體心臟實驗?zāi)茉谄渌蛩毓潭l件下對其中一個因素進行評價。離體胸、腹主動脈血管

5、實驗,在其它因素不變的條件下,可以更加直觀地觀察血管的反應(yīng)性,故本實驗采用離體動物心臟、血管進行相關(guān)實研究。
　　 第一部分新冠心蘇合活血方對動物離體心臟變力作用的研究
　　 目的:觀察新冠心蘇合活血方對大鼠、小鼠、家兔離體心臟變力作用
　　 方法:分別選取wistar大鼠、小鼠、家兔各20只。給予全價營養(yǎng)飼料,自由進食飲水,喂養(yǎng)一周后,分別用10％烏拉坦(lg/kg)腹腔注射麻醉,迅速開胸,剪斷與心臟相連的大血

6、管,分別取出大鼠、小鼠、家兔心臟,放于盛有充氧的低溫krebs液中,輕壓心臟將其內(nèi)殘留血液擠出,截取左、右心房,用絲線一端固定于盛有20ml經(jīng)95％02+5％CO2混合氣體持續(xù)飽和的Krebs液的麥?zhǔn)喜鄣撞?另一端連接張力換能器,用超級恒溫槽水浴循環(huán)維持在34.5-35.5℃左右,調(diào)整給予的前負(fù)荷,直至心肌收縮力達最大值,平衡15分鐘。用10-8mol/L的鈣離子激活標(biāo)本,連續(xù)三次后,給予新冠心蘇合活血方藥濃度在100mg/l(相當(dāng)給藥

7、0.02ml),15分鐘后用Krebs液沖洗3次,平衡15分鐘。如上法分別再給予新冠心蘇合活血方不同濃度150mg/l(相當(dāng)給藥量0.03ml)、200mg/l(相當(dāng)給藥量0.04ml)、250mg/l(相當(dāng)給藥量0.05ml)，采用MS4000U-1C生物信號定量記錄分析儀,系統(tǒng)采集不同濃度新冠心蘇合活血方對心房肌張力變化數(shù)據(jù),并分析其作用。
　　 結(jié)果:(1)新冠心蘇合活血方對大鼠離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其

8、作用降低。當(dāng)濃度100mg/l時其作用不甚明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時,其該藥在降低大鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻率明顯增強(p＜0.05或p＜0.01)。(2)新冠心蘇合活血方對小鼠離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其作用降低。當(dāng)濃度100mmg/l時其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時,其該藥在降低小鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻率

9、明顯增強(p＜0.05或p＜0.01)。(3)新冠心蘇合活血方對家兔離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其作用降低。當(dāng)濃度100mg/l時其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時,其該藥在降低家兔離體心肌收縮力,減慢心搏頻率明顯增強(p＜0.05或p＜0.01)。
　　 結(jié)論:(1)新冠心蘇合活血方對大鼠、小鼠、家兔離體心肌收縮力和心博均有降低心臟收縮力,減慢心搏頻率作用,從而可

10、改善或消除冠心病心絞痛癥狀。(2)當(dāng)該藥濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時,其降低動物離體心臟收縮力,減慢心搏頻率作用明顯增強。
　　 第二部分新冠心蘇合活血方對動物離體血管變力作用的研究
　　 目的:觀察新冠心蘇合活血方對大鼠離體血管變力作用
　　 方法:選取wistar大鼠20只,雌雄各半,體重180±20g,于清潔級動物房飼養(yǎng),室溫22-26℃,給予全價營養(yǎng)飼料,自由進食飲水,喂養(yǎng)一周后

11、,用10％烏拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉,迅速取出胸主動脈和腹主動脈,放于盛有充氧的低溫krebs液中,盡量去除動脈周圍結(jié)締組織,剪成0.7-1.4cm長的血管環(huán),用兩個不銹鋼細絲制成的三角形別針穿過血管環(huán),用絲線一端固定于盛有20ml經(jīng)95％O2+5％CO2混合氣體持續(xù)飽和的Krebs液的麥?zhǔn)喜鄣撞?另一端連接張力換能器,用超級恒溫槽水浴循環(huán)維持在34.5-35.5℃左右,調(diào)整前負(fù)荷,平衡15分鐘。用10-8mol/L的異丙腎上腺素

12、激活標(biāo)本,連續(xù)三次,給予新冠心蘇合活血方藥液,給藥方法同前,采用MS4000U-1C生物信號定量記錄分析儀,系統(tǒng)采集不同濃度新冠心蘇合活血方對胸主動脈和腹主動脈張力變化數(shù)據(jù),并分析其作用。
　　 結(jié)果:新冠心蘇合活血方對大鼠離體胸主動脈和腹主動脈收縮力隨著給藥濃度的增加其作用增強。當(dāng)濃度100mg/l時其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時,其該藥在降低大鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻