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文檔簡介
1、目的:研究四妙勇安湯醇沉藥液對體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)缺氧損傷模型的影響,探討四妙勇安湯醇沉藥液對缺氧人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響,從而研究四妙勇安湯對血管缺血灌注損傷的保護(hù)作用機(jī)制。
方法:制備四妙勇安湯的醇沉藥液;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株進(jìn)行傳代培養(yǎng)。將實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞分為三組,分別為(1)正常細(xì)胞組:正常的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞加入正常
2、培養(yǎng)液,放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h;(2)模型組:對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行缺氧處理后,加入正常培養(yǎng)液,然后放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)24h;(3)四妙勇安湯組:對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行缺氧處理后,加入含10%四妙勇安湯醇沉藥液的細(xì)胞培養(yǎng)液后,放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)24h。用酶聯(lián)免疫法測定各組細(xì)胞中白細(xì)胞介素-6(interleukin,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactor-alp
3、ha,TNF-α)的表達(dá);并用免疫組織化學(xué)方法檢測各組細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)生成量的表達(dá),用倒置相差顯微鏡觀察各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中棕黃色顆粒數(shù)目。
結(jié)果:三組細(xì)胞IL-6、TNF-α以及VEGF生成量的表達(dá)量結(jié)果經(jīng)方差分析均為p<0.01,均數(shù)做兩兩比較,結(jié)果差異均有顯著性。
①正常組內(nèi)皮細(xì)胞IL-6、 TNF-α表達(dá)均為最低,VEG
4、F表達(dá)為最高;
②模型組細(xì)胞IL-6、TNF-α表達(dá)均為最高,VEGF表達(dá)為最低;
③四妙勇安湯醇沉藥組IL-6、TNF-α表達(dá)均介于正常組和模型組之間,高于正常組,低于模型組。VEGF也介于正常組和模型組之間,低于正常組,高于模型組。三組細(xì)胞三種檢測指標(biāo)均數(shù)做兩兩比較,均為p<0.01,差異均有顯著性。
結(jié)論:四妙勇安湯對缺氧所致的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)有明顯影響,從而可以對損傷的血管
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