AngⅡ?qū)θ四氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞BMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)作為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β細(xì)胞因子超家族中的一員，在血管發(fā)育及血管病理生理過(guò)程中有著極其重要的作用，敲除：BMP-2基因的小鼠在妊娠期骨形成發(fā)育之前就會(huì)出現(xiàn)因心臟的缺陷而死亡，這足以證明了BMP-2在心血管系統(tǒng)的發(fā)生和發(fā)展中所起的重要作用。特別是BMP-2與血管鈣化關(guān)系較為密切，研究表明大約有80％的動(dòng)脈粥樣硬化病變中存在動(dòng)脈鈣化。許多證據(jù)也顯示：許多控制骨礦化過(guò)程的蛋白參與了骨鈣化的調(diào)節(jié)。

2、體外動(dòng)脈血管壁細(xì)胞的培養(yǎng)，在某些炎性刺激和致動(dòng)脈硬化因素刺激下可以誘導(dǎo)形成成骨樣細(xì)胞。許多與調(diào)節(jié)骨形成及骨結(jié)構(gòu)有關(guān)的蛋白在動(dòng)脈粥樣斑塊處發(fā)現(xiàn)有表達(dá)，而B(niǎo)MP-2是骨鈣化也是血管鈣化中強(qiáng)有力的基本因素，所以研究BMP-2對(duì)于研究血管鈣化和動(dòng)脈粥樣硬化中的斑塊鈣化有重要的意義。有研究發(fā)現(xiàn)高血壓患者人群中鈣化的發(fā)生率比較高，而腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAS)及其主要活性物質(zhì)血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中居于核心地位，

3、起著關(guān)鍵性作用，它通過(guò)影響血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞、促進(jìn)血管新生、影響脂質(zhì)代謝等多方面參與動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理過(guò)程，但其與BMP-2及與動(dòng)脈鈣化的關(guān)系如何，相關(guān)研究鮮有報(bào)道。本課題通過(guò)基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)觀察Ang Ⅱ刺激對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌BMP-2的影響，來(lái)研究AngⅡ與血管鈣化之間的可能關(guān)系，為臨床冠心病和血管鈣化的防治提供線索和思路。 目的： 研究Ang Ⅱ?qū)θ四氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)BMP-2的影響，初步

4、探討AngⅡ?qū)MP-2表達(dá)影響的可能機(jī)制。 方法： 培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，測(cè)定不同刺激條件下細(xì)胞培養(yǎng)上清液中BMP-2的濃度。同時(shí)用免疫組化法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)NFkb-P65的表達(dá)。 結(jié)果： 1)不同濃度Ang Ⅱ刺激使人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的BMP-2水平呈劑量依賴性增加，BMP-2從無(wú)AngⅡ刺激組的14.76±1.44 2pg/ml升高到20umol/L AngⅡ刺激組的78.51±2.1

5、6pg/ml(p<0.05)，厄貝沙坦干預(yù)使20umol/L AngⅡ刺激組的BMP-2表達(dá)水平從78.5 1±2.16 pg/ml下降至22.62±2.47 pg/ml(p<0.05)。 2、)細(xì)胞免疫組化結(jié)果顯示，AngⅡ在增加BMP-2表達(dá)的同時(shí)，NFkb-P65表達(dá)也相應(yīng)增強(qiáng)，厄貝沙坦干預(yù)使Ang Ⅱ誘導(dǎo)的NFkb-P65的表達(dá)水平下降。 結(jié)論： 1)AngⅡ可以劑量依賴性刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞BMP-2的