中藥Ⅱ號(hào)洗液濕敷對(duì)急性濕疹實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織炎癥及CGRP影響.pdf

1、目的：通過(guò)中藥Ⅱ號(hào)洗液濕敷對(duì)小鼠急性濕疹模型的皮膚組織炎癥及降鈣素相關(guān)基因肽（CGRP）影響的實(shí)驗(yàn)研究，探討其治療急性濕疹的機(jī)理。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)研究實(shí)驗(yàn)1.取昆明種遠(yuǎn)交系健康小白鼠40只,體重(2 0±2 g)，雌雄比 1：1，隨機(jī)分4組，每組10只，分別為空白組、模型對(duì)照組、3％硼酸組、中藥Ⅱ號(hào)洗液組。空白組不作做任何處理，模型對(duì)照組、3％硼酸組、中藥Ⅱ號(hào)洗液組均采用2,4二硝基氟苯（DNFB）造模。用丙酮、橄欖油(4:1

2、)為溶劑，稀釋2,4二硝基氟苯為0.2％及0.5％溶液備用。小鼠背部脫毛，面積為2×2cm2，在脫毛范圍內(nèi)均勻涂布0.5％DNFB，每天1次，連續(xù)2天，第6天進(jìn)行激發(fā)：在三組小鼠左右耳背面涂抹0.2％DNFB。激發(fā)后72 h,將硼酸組、中藥組分別外用3﹪硼酸、中藥Ⅱ號(hào)洗液浸濕無(wú)菌紗布，膠帶固定濕敷小鼠兩耳雙側(cè)面，每天2次,每次30min,連續(xù)10天，模型對(duì)照組不作處理。于停藥后24h用頸椎脫臼法處死小鼠，測(cè)四組小鼠：(1)左耳厚度差:用

3、千分尺測(cè)定耳中部厚度，計(jì)算左耳誘發(fā)后厚度差(S1)。(2)耳質(zhì)量差:測(cè)定厚度后以打孔器（8mm）取耳中部組織塊，分析天平測(cè)質(zhì)量，計(jì)算左耳組織塊的質(zhì)量差(S2)。比較各組數(shù)值，結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。實(shí)驗(yàn)2.真皮炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)：實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)驗(yàn)（1），取各組小塊左耳組織，石蠟包埋切片,制成常規(guī)蘇木素—伊紅（HE）染色,分別計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野(HPF)淋巴細(xì)胞，取其平均值，計(jì)算出各組平均值。實(shí)驗(yàn)3小鼠右耳降鈣素相關(guān)基因肽測(cè)試實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)驗(yàn)（1），切下

4、各組小鼠右耳，天平測(cè)量質(zhì)量，按比例加入冷冰醋酸液0.5ml，100℃水浴10分鐘，入組織勻漿機(jī)勻漿3分鐘，至見不到顆粒狀物,將勻漿液移入離心管中，離心機(jī)3000轉(zhuǎn)∕分，離心3分鐘，取上清液移入潔凈瓶?jī)?nèi)，滴入ELISA試劑盒，移入酶標(biāo)儀測(cè)定降鈣素相關(guān)基因肽含量。
　　 結(jié)果：1.中藥Ⅱ號(hào)洗液組在左耳腫脹度均比模型對(duì)照組、硼酸組小(p<0.05)；2.中藥Ⅱ號(hào)洗液組抑制小鼠真炎性細(xì)胞細(xì)胞浸潤(rùn)的作用明顯優(yōu)于硼酸組(p<0.05)；3.