細(xì)顆粒物對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ACE、AT1R基因表達的影響.pdf

1、目的:
　　 分析細(xì)顆粒物(PM2.5)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）活力和ACE、AT1R mRNA和蛋白表達的影響，探討培哚普利對HUVEC細(xì)胞ACE、AT1R表達的調(diào)控。
　　 方法:
　　 于2010年10月-2011年12月采集長沙市非工業(yè)區(qū)大氣的PM2.5，并提取PM2.5的水溶性和非水溶性成分。分別用100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml（稱為低濃度、中濃度、高濃度）PM2.5水溶性

2、和非水溶性成分染毒HUVEC細(xì)胞24h。采用MTT法比較不同濃度PM2.5水溶性和非水溶性成分染毒對HUVEC細(xì)胞活力的影響，采用實時熒光定量PCR和Western Blot方法分析HUVEC細(xì)胞ACE、AT1R mRNA和蛋白表達的差異。利用高濃度PM2.5染毒HUVEC細(xì)胞0h、12h、24h和48h，比較不同時間PM2.5染毒對細(xì)胞活力和ACE、AT1R基因表達的影響。同時在PM2.5染毒HUVEC細(xì)胞時加入10μmol/L的培哚

3、普利進行干預(yù)，分析培哚普利對HUVEC細(xì)胞ACE、AT1R表達的調(diào)控。
　　 結(jié)果:
　　 1.PM2.5對HUVEC細(xì)胞活力的抑制效應(yīng):水溶性和非水溶性成分各濃度組細(xì)胞存活率均低于空白對照組(P＜0.05)，且高濃度組＜中濃度組＜低濃度組(P＜0.05)。當(dāng)染毒劑量同為中、高濃度時，非水溶性成分對細(xì)胞活力影響較水溶性成分明顯(P＜0.05)。高濃度PM2.5染毒不同時間組細(xì)胞存活率均低于0h組(P＜0.05)，且48h

4、組＜24h組＜12h組(P＜0.05)。
　　 2.PM2.5對HUVEC細(xì)胞ACE基因表達的影響:水溶性成分中、高濃度組和非水溶性成分各濃度組細(xì)胞ACE mRNA和蛋白表達量均高于空白對照組(P＜0.05)，且非水溶性成分高濃度組ACE表達量最高(P＜0.05)。高濃度水溶性成分24h、48h組和非水溶性成分各不同時間組細(xì)胞ACE基因表達量高于0h組(P＜0.05)，且非水溶性成分24h組ACE表達量最高(P＜0.05)。

5、r>　　 3.PM2.5對HUVEC細(xì)胞AT1R基因表達的影響:水溶性和非水溶性成分高濃度組細(xì)胞AT1R mRNA和蛋白表達量高于空白對照組(P＜0.05)，且非水溶性成分高濃度組AT1R表達量最高(P＜0.05)。高濃度水溶性和非水溶性成分各不同時間組細(xì)胞AT1R表達量高于0h組(P＜0.05)，且非水溶性成分48h組AT1R表達量最高(P＜0.05)。
　　 4.培哚普利干預(yù)對HUVEC細(xì)胞ACE、AT1R表達的調(diào)控:培哚

6、普利干預(yù)后，水溶性和非水溶性成分低、中、高濃度組細(xì)胞ACEmRNA和蛋白表達量均顯著低于未加藥物組(P＜0.05);但AT1RmRNA和蛋白表達量無顯著改變(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.PM2.5染毒可導(dǎo)致HUVEC細(xì)胞活力降低，以非水溶性成分對細(xì)胞活力影響更為明顯。
　　 2.PM2.5染毒可促進HUVEC細(xì)胞ACE、AT1R基因表達，以非水溶性成分更為明顯。培哚普利可抑制PM2.5染毒后ACE基