磁性納米顆粒的制備及其在藥物作用靶點(diǎn)生物淘洗中的應(yīng)用.pdf

1、磁性顆粒已經(jīng)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、蛋白質(zhì)、核酸等生物細(xì)胞成分的分離與純化,隨著磁性顆粒研究和發(fā)展,又不斷應(yīng)用于其它領(lǐng)域,如藥物靶向治療、熱療、淋巴節(jié)及血管成像等領(lǐng)域,為適應(yīng)不同領(lǐng)域應(yīng)用的要求,研究者需要研究制備出不同功能特性的磁性顆粒。 在本文中,我們發(fā)展了一種用乳酸聚合而成的醇酸聚合物作為模板制備磁性氧化鐵納米顆粒的方法。合成的醇酸聚合物,是一種新型的高分子材料,用它作為合成磁性納米顆粒的模板,具有獨(dú)特的枝權(quán)狀結(jié)構(gòu)性質(zhì),在水溶液中分

2、散良好,而且具有豐富的羧基基團(tuán)和羥基基團(tuán).將此醇酸聚合物和鐵離子按比例混合,鐵離子可以與醇酸聚合物的羧基形成配位鍵,滴加OH<'->后,會(huì)生成晶核,并進(jìn)一步生長成氧化鐵納米粒子。作為模板的醇酸聚合物分子不僅提供了大量類似晶核,而且其枝權(quán)狀結(jié)構(gòu)又在一定程度上限制了晶體顆粒的過度生長和團(tuán)聚。我們對合成納米顆粒的醇酸聚合物模板的濃度,與鐵離子濃度的比值,以及終點(diǎn)時(shí)的pH值等合成條件進(jìn)行了探索和優(yōu)化.結(jié)果顯示,當(dāng)聚合物模板和鐵離子濃度的比值為1

3、00mg聚合物/4.22mM鐵離子,反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)的pH值為10左右時(shí),合成獲得的磁性粒子粒徑經(jīng)進(jìn)一步純化后,處于納米量級(jí)且在混懸液中分布比較均一、穩(wěn)定。 我們對合成的磁性納米粒子的物化特性進(jìn)行了一系列的表征觀察:包括應(yīng)用透射電子顯微鏡對磁性顆粒納米顆粒結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,利用 X-射線衍射驗(yàn)證氧化鐵磁性顆粒的晶形,利用激光粒度散射儀測量磁性顆粒的水合粒徑分布,利用磁滯回線分析顆粒的順磁特性,利用元素分析確定磁性納米粒子中的高聚物組分,

4、以及利用化學(xué)反應(yīng)來檢測磁性顆粒表面的活性基團(tuán)功能等等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示合成的磁性顆粒為分散良好的納米粒子,水合粒徑在80nm左右,顆粒內(nèi)的單個(gè)粒子粒徑為10納米左右,在表面有羧基基團(tuán)存在,且可以通過化學(xué)反應(yīng)連接表面修飾分子,合成的磁性顆粒不易聚集,可以穩(wěn)定存在于水溶液中。將制備的磁性納米顆粒應(yīng)用于MRI成像實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明有較好的增強(qiáng)T2信號(hào)效應(yīng)。 進(jìn)一步地,我們嘗試了應(yīng)用納米磁性顆粒在水溶液中分散均勻良好,但又易于收集的特點(diǎn),選擇

5、中藥丹參中的有效成分丹酚酸B作為模型藥物,將丹酚酸B連接在磁性粒子表面,通過修飾后的磁性粒子與噬菌體蛋白展示庫的相互作用, 利用磁場分離和富集與丹酚酸B結(jié)合的噬菌體,進(jìn)行多次生物淘洗。對最終獲得的噬菌體進(jìn)行測序,獲得其編碼的基因和多肽序列,并通過BLAST尋找相關(guān)蛋白。通過多輪篩選,我們獲得了一系列丹酚酸B可能作用的靶點(diǎn)序列。并選取其中的一個(gè)噬菌體克隆應(yīng)用毛細(xì)管親和電泳技術(shù)表征了丹酚酸B與其的特異性結(jié)合,確認(rèn)了通過磁性粒子生物淘洗研究小