小兒腎母細(xì)胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測(cè)及意義.pdf_第1頁
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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文小兒腎母細(xì)胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測(cè)及意義姓名:張蛟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):小兒外科學(xué)指導(dǎo)教師:王家祥20070501鄭州大學(xué)2007屆碩士論文小兒腎母細(xì)胞瘸j|lL清蛋白質(zhì)標(biāo)記物檢測(cè)及意義經(jīng)母細(xì)胞瘤9例、肝母細(xì)胞瘤5例、胰母細(xì)胞瘤2例、腹膜后惡性畸胎瘤5例、橫紋肌肉瘤3例、腎上腺皮質(zhì)癌1例),正常對(duì)照組20例。所有惡性腫瘤標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)。腎母細(xì)胞瘤組男16例,女14例,平均年齡2801歲。其他小兒腹部實(shí)體腫瘤組男1

2、l例,女14例,平均年齡3501歲。正常對(duì)照組與腎母細(xì)胞瘤組年齡、性別相匹配。12設(shè)備表面增強(qiáng)激光解析電離一飛行時(shí)間質(zhì)譜(SurfaceEnhancedLaserDesorptionflonizationTimeofFlightMassSpectrometry,SELDlTOFMS),PBSⅡCiphergenInc美國)。主要參數(shù):收集范圍為1000—50000;優(yōu)化范圍為2000—3000013芯片弱陽離子交換(WCX2)蛋白芯片。

3、14應(yīng)用軟件和標(biāo)記物評(píng)價(jià)指標(biāo)應(yīng)用軟件:ProteinchipSoRware31,BiomarkerWizard和ZUCIProteinChipDataAnalyzeSystem軟件包。支持向量機(jī)(svM):MATLAB650SUSVM工具箱。評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的指標(biāo):靈敏度、特異性、Youden指數(shù)。2方法21血清樣本處理:U9溶液處理冰浴中解凍的血清標(biāo)本,lOOMraNaNC(PH=4)稀釋后,和Bioprocessor預(yù)處理過的WCX2蛋白芯

4、片結(jié)合反應(yīng)60min,上述NaNC緩沖液清洗芯片,取出芯片風(fēng)干后點(diǎn)50%飽和的SPA溶液,上機(jī)讀片22SELDI操作:SELDI質(zhì)譜儀完成設(shè)置后,記錄每一例樣本的血清蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖。原始數(shù)據(jù)先用ProteinchipSoftware31做校正,使總離子的強(qiáng)度及分子量均一化。用BiomarkcrWizard和ZUCIProtdnChipDataAnalyzeSystem軟件包過濾噪音局部極值的方法找出樣本各自的峰,并過濾信噪比小于2的峰,以

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