丹參葉抗氧化活性及相關(guān)酚酸類成分的研究.pdf

1、唇形科鼠尾草屬植物丹參（Salvia miltiorrhiza bunge.）通常以根部入藥，是治療心腦血管疾病的傳統(tǒng)中藥材，具有活血化瘀，通絡(luò)止痛，清熱安神的功效。隨著臨床應(yīng)用范圍的擴大，在尋找新藥源的過程中，有人對丹參葉進行了初步研究，證明它們具有與根類似的活性成分和藥理作用。為了進一步開發(fā)利用丹參地上部分資源，本論文對丹參地上部分莖、葉的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)預(yù)試，并在此基礎(chǔ)上對丹參不同部位的抗氧化活性及相關(guān)酚酸類成分的檢測分析、分離

2、提取進行了研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴通過綜合系統(tǒng)預(yù)試法試驗和營養(yǎng)成分檢測結(jié)果可知，丹參莖葉基本包含了各類化學(xué)成分，含有酚類成分和鞣質(zhì)、多糖及甙類、多肽和蛋白質(zhì)有機酸、生物堿、甾體、黃酮、香豆素和萜類內(nèi)酯以及揮發(fā)油等物質(zhì)。⑵采用凱氏定氮法檢測丹參葉、莖中蛋白質(zhì)的含量分別為17.90％、13.27%，索氏提取法檢測粗脂肪含量分別為4.48%、3.03%，苯酚-硫酸法檢測總糖的含量分別為30.30%、24.5%。⑶以丹參不同部位

3、根、莖、葉為研究對象，在測定其總酚酸及總黃酮含量的基礎(chǔ)上，以 Vc為陽性對照，選用總還原力、DPPH·自由基清除率和 PUFA（多不飽和脂肪酸）過氧化體系對不同部位醇提物進行抗氧化活性評價。結(jié)果表明，葉中總酚和總黃酮含量顯著高于其它部位，其總酚酸含量分別為根和莖的1.07和6.81倍；總黃酮含量分別為根和莖的4.79和14.5倍。在預(yù)設(shè)質(zhì)量濃度為20 mg/mL時，丹參葉醇提取物的抗氧化活性最強，其還原力、DPPH·自由基清除率、對PU

4、FA過氧化體系的抑制作用分別相當(dāng)于Vc的1.08、1.01和5.89倍，顯著高于根部和莖部?？偡铀岬暮亢涂寡趸钚灾g具有很高的相關(guān)性，表明抗氧化活性可能與其酚酸類物質(zhì)有關(guān)。⑷通過單因素試驗和響應(yīng)面分析法，確定超聲波輔助提取丹參葉總酚酸的最佳條件為：乙醇濃度63.00%，浸提時間43.00min，溫度50.00℃，液料比33：1（mL/g），在此條件下，總酚酸得率達(dá)到7.78%。驗證實驗表明，所得模型方程能較好地預(yù)測實驗結(jié)果。⑸采用大

5、孔吸附樹脂對丹參葉總酚酸粗提液進行純化研究，結(jié)果表明，NKA-9樹脂較適合于丹參葉酚酸類成分的純化。純化的適宜條件為：樣液初始濃度3.5mg/mL，pH值為6、2.0mL/min的流速上樣吸附，樹脂對酚酸類化合物吸附量最大，當(dāng)上樣體積達(dá)3BV時開始泄露，當(dāng)上樣7個柱床體積時，樹脂吸附可達(dá)到飽和；對吸附后的樹脂進行洗脫，先采用70%乙醇溶液作為洗脫劑，洗脫流速為1.5mL/min，2.2BV的洗脫劑基本可以將吸附的酚酸類物質(zhì)洗脫下業(yè)，解吸

6、率達(dá)93%。純化后的總酚酸純度提高至51.8%。⑹對丹參葉酚酸類成分進行HPLC分析檢測可知：丹參素、迷迭香酸、咖啡酸、丹酚酸A、丹酚酸B、原兒茶醛、阿魏酸均被檢出，其中，迷迭香酸的含量最高達(dá)88.03mg/g，其含量高低順序為：迷迭香酸（88034.95ug/g）>咖啡酸（761.00ug/g）>丹酚酸 B（414.95ug/g）>丹參素（342.45ug/g）>阿魏酸（283.59ug/g）>丹酚酸A（144.48ug/g）>原兒茶