地鱉蟲(chóng)生物堿的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定及急性毒理研究.pdf_第1頁(yè)
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1、地鱉蟲(chóng),俗名土鱉蟲(chóng),是一種傳統(tǒng)的中藥材,具有散血淤、消堅(jiān)結(jié)、解凝活血、接骨續(xù)筋、消腫止痛、下乳通經(jīng)等廣泛的藥理活性,早自秦漢時(shí)期我國(guó)勞動(dòng)人民就開(kāi)始用地鱉蟲(chóng)來(lái)預(yù)防和治療疾病。地鱉蟲(chóng)“味咸、性寒、有微毒”,其毒性和某些藥理活性可能來(lái)源于所含的生物堿,但是目前關(guān)于地鱉蟲(chóng)生物堿的分離提取和藥理活性研究報(bào)道很少。為了探明地鱉蟲(chóng)中所含生物堿的類(lèi)別和毒性,本文建立了地鱉蟲(chóng)總生物堿的提取方法,并對(duì)提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化,同時(shí)對(duì)總生物堿進(jìn)行分離純化,利用現(xiàn)代

2、分析技術(shù)對(duì)地鱉蟲(chóng)生物堿的類(lèi)別和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究,此外還對(duì)地鱉蟲(chóng)總生物堿的急性毒性和地鱉蟲(chóng)及地鱉蟲(chóng)生物堿粗品中的無(wú)機(jī)元素進(jìn)行了分析研究,所得主要結(jié)論歸納如下: 1.地鱉蟲(chóng)生物堿提取工藝研究 比較了酸水提取法和乙醇提取法提取地鱉蟲(chóng)總生物堿的得率,結(jié)果表明采取酸水法提取得率較高。通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得出,在影響地鱉蟲(chóng)總生物堿提取得率的因素中,浸提液pH值和浸提溫度最為顯著,其次是料液比和浸提時(shí)間,最佳提取工藝條件為選用p

3、H值2,料液比為l:12(W/v)的稀鹽酸溶液,80℃下提取120min。 2.地鱉蟲(chóng)生物堿分離純化與鑒定 通過(guò)pH值梯度液液萃取、硅膠柱層析、薄層層析等方法對(duì)地鱉蟲(chóng)總生物堿進(jìn)行分離純化,得到7個(gè)生物堿組分,并應(yīng)用紫外掃描、紅外光譜、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。結(jié)果表明,地鱉蟲(chóng)中含有多種生物堿成分,其中甾體類(lèi)生物堿1種,氨基酸衍生物類(lèi)生物堿3種,哌啶類(lèi)生物堿2種,其他類(lèi)生物堿8種。 3.地鱉蟲(chóng)及其粗生

4、物堿中的無(wú)機(jī)元素分析 采用ICP-OES法測(cè)定了地鱉蟲(chóng)及其生物堿粗品I中的無(wú)機(jī)元素,結(jié)果顯示,地鱉蟲(chóng)及其粗生物堿中均含有豐富的礦物元素鈣、鎂、鐵、鋅,此外還含有微量的有毒元素鉛,經(jīng)過(guò)分離后的生物堿粗品I中鉛含量顯著降低。地鱉蟲(chóng)及其粗生物堿中均未檢出微量有益元素硒。 4.地鱉蟲(chóng)生物堿提取物急性毒性研究 急性毒性實(shí)驗(yàn)表明,地鱉蟲(chóng)生物堿提取物對(duì)小鼠半數(shù)致死劑量LD<,50>為294.26mg/kg,LD<,50>的95

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