功能MRI動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)大鼠急性缺血性腦卒中缺血再灌注損傷及其與預(yù)后相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分 大鼠急性缺血性腦卒中BBB通透性動(dòng)態(tài)變化研究
　　目的:本實(shí)驗(yàn)采用大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(Middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，運(yùn)用動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)(Dynamic contrast enhanced，DCE)磁共振成像(Magnetic resonance imaging，MRI)技術(shù)，研究急性缺血性腦卒中血腦屏障(Bloodbrain b

2、arrier，BBB)通透性動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。材料與方法:采用線栓栓塞法制備SD大鼠MCAO模型60只，根據(jù)缺血時(shí)間（3 h、6h、永久栓塞）及再通時(shí)間(2 h、6h、12 h、24 h)，隨機(jī)分為12組，每組5只。各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)行MRI檢查，所得圖像經(jīng)西門子工作站處理后測(cè)量BBB通透性參數(shù):Ktrans、Ve、Kep及rKtrans、rVe、rKep，觀察各組BBB通透性變化，并與病理學(xué)“金標(biāo)準(zhǔn)”伊文思藍(lán)(Evans blue，EB)染色

3、漏出量相對(duì)比。結(jié)果:缺血3小時(shí)、6小時(shí)組再灌注后BBB通透性均呈現(xiàn)雙相性改變，即再通后2小時(shí)及6小時(shí)rKtrans值與rVe值升高，rKep值降低，BBB通透性增高，再通12小時(shí)BBB通透性降低，再通24小時(shí)通透性再次升高，均以再通6小時(shí)BBB通透性最大，缺血6小時(shí)組各再通時(shí)間點(diǎn)均較缺血3小時(shí)組BBB通透性大。永久栓塞組BBB通透性呈現(xiàn)單相性改變，即隨著缺血時(shí)間延長(zhǎng)BBB通透性持續(xù)輕度增高。MRI觀察結(jié)果與EB染色漏出量相一致。各組組內(nèi)

4、及組間比較rKtrans值、rVe值與rKep值均具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05），且Ktrans值與Ve值呈正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)為0.93，P＜0.01）;Ktrans值與Kep值呈負(fù)相關(guān)（相關(guān)系數(shù)為-0.84， P＜0.01）;Ve值與Kep值呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為-0.8，P＜0.01)。結(jié)論:缺血再灌注組BBB通透性呈雙向性變化，永久栓塞組BBB通透性呈單相性變化。DCE-MRI技術(shù)可準(zhǔn)確反映腦缺血后BBB通透性改變，BBB通透性受缺血時(shí)

5、間及再通時(shí)間兩個(gè)因素影響，隨著缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，BBB通透性增加所需的時(shí)間就越短，BBB破壞的時(shí)間較早，且破壞程度明顯增加。
　　第二部分 DCE-MRI技術(shù)預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中HT的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:本實(shí)驗(yàn)通過觀察缺血再灌注損傷引起的出血性轉(zhuǎn)換(Hemorrhagictransformation，HT)發(fā)生率，從而進(jìn)一步探討DCE-MRI技術(shù)早期預(yù)測(cè)HT可行性。材料與方法:健康雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，

6、分別為3h、4.5h、6h、7.5 h、9h缺血再灌注組。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均建立MCAO缺血再灌注模型，并于再灌注前即刻及灌注后6小時(shí)分別行MRI檢查，掃描序列包括:DWI(Diffusionweighted imaging，DWI)、DCE-MRI及磁敏感加權(quán)成像(Susceptibility weightedimaging，SWI)。根據(jù)SWI圖像及最終病理結(jié)果，比較性分析再灌注前HT組及無HT組組間rKtrans、rVe及rKep值差

7、異性，并行二分類Logistic回歸及ROC曲線分析，判斷再灌注前預(yù)測(cè)HT發(fā)生的危險(xiǎn)因素及其敏感性、特異性。結(jié)果:3h、4.5h缺血再灌注組均未見HT發(fā)生，6h、7.5h、9h缺血再灌注組中HT發(fā)生分別為1只、3只及4只，缺血6h后HT發(fā)生率為26.7％?；仡櫺苑治鯤T組及無HT組再灌注前rKtrans、rKep、rVe值，再灌注前紋狀體區(qū)及皮層區(qū)rKtrans及rVe值HT組均高于無HT組（P＜0.05），而再灌注前紋狀體區(qū)及皮層區(qū)r

8、Kep值兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。二分類Logistic回歸分析顯示:僅紋狀體區(qū)rKtrans值是預(yù)測(cè)HT的危險(xiǎn)因素，其OR值為263.614，結(jié)合ROC曲線，取Youden指數(shù)最大值為預(yù)測(cè)出血的最佳臨界點(diǎn)，紋狀體rKtrans值為1.565時(shí)，預(yù)測(cè)HT的敏感性91.4％，特異性為73.9％。結(jié)論:紋狀體區(qū)rKtrans值可成為預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中繼發(fā)HT的影像學(xué)指標(biāo)。除了時(shí)間點(diǎn)外（大于6小時(shí)），結(jié)合紋狀體區(qū)rKtrans值，

9、將有助于早期預(yù)測(cè)HT。
　　第三部分 DCE-MRI技術(shù)預(yù)測(cè)缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:本實(shí)驗(yàn)觀察不同缺血時(shí)間點(diǎn)大鼠MCAO模型缺血再灌注前、后影像學(xué)及行為學(xué)動(dòng)態(tài)變化，分析DCE-MRI參數(shù)與急性缺血性腦卒中預(yù)后的關(guān)系，探討有效預(yù)測(cè)及監(jiān)測(cè)缺血再灌注損傷的影像學(xué)指標(biāo)。材料與方法:健康雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為3h、4.5 h、6h、7.5 h、9h缺血再灌注組。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均建立MCAO缺血再

10、灌注模型，每組動(dòng)物于再灌注前即刻及再灌注后6小時(shí)分別行MRI檢查，根據(jù)SWI圖像及病理學(xué)結(jié)果將發(fā)生HT的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物剔除，其余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為入組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，入組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的DCE原始數(shù)據(jù)經(jīng)工作站后處理，測(cè)量得到缺血腦組織皮層區(qū)及紋狀體區(qū)rKtrans、rVe及rKep值，并進(jìn)一步求得灌注前、后的各參數(shù)差值(ΔrKtrans、ΔrVe及ΔrKep);入組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于再灌注前即刻及再灌注后24小時(shí)行神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分，求得再灌注前、后神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分差

11、值，神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分差值為正值認(rèn)為預(yù)后良好，神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分差值為負(fù)值或0認(rèn)為預(yù)后不良;將代表BBB通透性的各參數(shù)差值與代表最終預(yù)后的神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分差值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，尋找可以預(yù)測(cè)腦卒中缺血再灌注損傷的DCE指標(biāo)，確定最佳預(yù)測(cè)指標(biāo)及其最佳臨界點(diǎn)、敏感性及特異性。結(jié)果:不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療前后紋狀體區(qū)rKtrans值有顯著差異(F=64.94，P=0.000)，多重比較，組間ΔrKtrans值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ΔrKtrans值隨缺

12、血時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增高。不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療前后皮層區(qū)rKtrans值有顯著差異(F=6.973，P=0.000)，多重比較，缺血3h、4.5h及6h組間ΔrKtrans值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但均高于缺血7.5 h及9h組的ΔrKtrans值(P＜0.05），缺血7.5h與9h組間ΔrKtrans值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療后紋狀體區(qū)rVe間有顯著差異(F=67.935，P=0.000)，多重比較，缺血

13、4.5 h及6h組間ΔrVe值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，余組間ΔrVe值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療后皮層區(qū)rVe值間有顯著差異(F=70.352，P=0.000)，多重比較，缺血4.5h及6h間ΔrVe值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），余組間ΔrVe值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05）。不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療后紋狀體區(qū)rKep值間有顯著差異(F=46.808，P=0.000)，多重比較，缺血3h

14、及4.5 h間ΔrKep值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），余組間ΔrKep值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。不同缺血時(shí)間點(diǎn)治療后皮層區(qū)rKep值間有顯著差異(F=143.317，P=0.000)，多重比較，缺血3h及4.5h間ΔrKep值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），余組間ΔrKep值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。將指標(biāo)進(jìn)行二分類Logistic回歸分析顯示:紋狀體區(qū)ΔrKtrans值，皮層區(qū)ΔrVe值是預(yù)后不良