PI3K-AKt-eNOS-HSP70介導(dǎo)阿托伐他汀后處理減輕2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷.pdf

1、目的：研究顯示，藥物后處理可通過激活PI3K/Akt/eNOS信號(hào)通路減輕心肌缺血再灌注損傷。然而，藥物后處理對(duì)糖尿病心肌缺血再灌注損傷是否有保護(hù)作用，國內(nèi)外報(bào)道仍有很大爭議。本實(shí)驗(yàn)通過在體2型糖尿病大鼠（GK大鼠）心肌缺血再灌注損傷模型，探討不同劑量阿托伐他汀后處理對(duì)2型糖尿病GK大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制。
　　方法：將GK大鼠70只，體重280-350g隨機(jī)分為7組（n=10只），分別為：（1）假手術(shù)組（Sham組

2、）：只穿線不結(jié)扎左前降支；剩余6組均予心肌缺血40min，再灌注180min處理：（2）缺血再灌注對(duì)照組（I/R組）：不予其他處理；（3-6）不同劑量（0.1,0.5,1或2mg/kg）阿托伐他汀后處理組（AP0.1,0.5,1或2mg/kg組）：再灌注前3min頸外靜脈緩慢推注不同劑量阿托伐他汀(用10％DMSO溶解)；（7）理想劑量阿托伐他汀后處理+LY294002組（AP+LY組），再灌注前15min經(jīng)頸外靜脈緩慢推注磷酸肌醇3激

3、酶（PI3K）特異性抑制劑LY294002（0.3mg/kg），再灌注前3min頸外靜脈緩慢推注阿托伐他汀。ELISA試劑盒測(cè)定血清鈣蛋白(cTnT)水平；氯化三苯基四氮唑（TTC）染色測(cè)定心肌梗死面積；電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化及Western blot測(cè)定心肌組織磷酸化蛋白激酶B（AKt）蛋白（p-Akt）、總Akt(t-Akt)、磷酸化eNOS蛋白（p-eNOS）及總eNOS(t-eNOS)蛋白、HSP-70的表達(dá)。
　　

4、結(jié)果：1、與I/R組相比，不同劑量（0.1,0.5,1或2mg/kg）阿托伐他汀后處理組血清cTnT，心肌梗死面積減小，心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷程度減輕，F(xiàn)lameng評(píng)分改善（P<0.05）。2、相對(duì)于阿托伐他汀后處理0.1mg/kg組、0.5mg/kg組以及1mg/kg組，阿托伐他汀后處理2mg/kg組，能進(jìn)一步減小心肌梗死面積，減小血清cTnT值，減輕心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷程度（P<0.05）。3、與I/R組相比，不同劑量（0.1,0.

5、5,1或2mg/kg）阿托伐他汀后處理組Akt和eNOS的磷酸化水平增加，HSP70的表達(dá)水平增加（P<0.05）。4、相對(duì)于阿托伐他汀后處理0.1mg/kg組、0.5mg/kg組以及1mg/kg組，阿托伐他汀后處理2mg/kg組，能明顯使 Akt和eNOS的磷酸化水平增加，HSP70的表達(dá)水平增加。5、與I/R組相比，阻滯劑組心肌梗死面積、血清cTnT值、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷程度、AKt和eNOS的磷酸化水平、HSP70的表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)