葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白與重癥急性胰腺炎中性粒細(xì)胞凋亡關(guān)系研究.pdf

1、目的:探討葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)在牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)的大鼠重癥急性胰腺炎時(shí)對(duì)中性粒細(xì)胞凋亡的作用。
　　方法:將54只雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩組,分別建立假手術(shù)組(SO)及重癥急性胰腺炎組(SAP)模型,SO組24只、SAP組30只,5％的牛黃膽酸鈉逆行胰膽管注射制備大鼠重癥急性胰腺炎模型,對(duì)照組只開腹翻動(dòng)胰腺即縫合,造模后分別于3h,6h,12h觀察大鼠的一般情況及死亡率,并處死大鼠,抽取靜脈血測定各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清淀粉酶的濃度

2、,分離中性粒細(xì)胞并用流式細(xì)胞儀檢測中性粒細(xì)胞的凋亡率,提取中性粒細(xì)胞蛋白做western-blot測定GRP78,Mcl-1蛋白的表達(dá),用HE染色切片觀察胰腺的病理變化并對(duì)胰腺組織進(jìn)行病理評(píng)分。
　　結(jié)果:重癥急性胰腺炎組的血清淀粉酶的濃度明顯高于對(duì)照組(P<0.01), SAP組在3h,6h,12h的淀粉酶濃度逐漸升高(P<0.01),至術(shù)后12h升至(6246.00±602.931);SAP組中性粒細(xì)胞凋亡率較SO組明顯降低,

3、隨時(shí)間延長而下降(P<0.01),至術(shù)后12h降至(1.300±0.5812);western-blot顯示SAP組中性粒細(xì)胞中GRP78,Mcl-1的表達(dá)較SO組明顯升高,隨著時(shí)間延長更明顯;SAP大鼠 PMN的凋亡率與 GRP78,Mcl-1蛋白水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.836,P<0.01)、(r=-0.895,P<0.01);病理HE染色SAP組有大量炎細(xì)胞及紅細(xì)胞浸潤。
　　結(jié)論:本研究表明,大鼠重癥胰腺炎時(shí),外周血中性粒