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文檔簡介
1、研究目的:
檢測健康成年女性外周血T細胞與不同濃度白術內酯I誘導后的MyD88+人卵巢癌SKOV-3細胞上清共培養(yǎng)后,T細胞亞群(CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg)的分布改變;探究白術內酯I是否可以下調MyD88+人卵巢癌SKOV-3細胞介導的免疫抑制作用。
研究方法:
不同濃度白術內酯I誘導MyD88+人卵巢癌SKOV-3細胞,獲得培養(yǎng)上清后,與健康成年女性外周血分離的T細胞共培養(yǎng)24小時,用
2、流式細胞儀測定T細胞亞群CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg百分比,并計算CD4+/ CD8+比值。
研究結果:
1、SKOV-3細胞上清處理T細胞組的CD3+CD4+表達(40.453±0.270)低于正常T細胞組(48.247±0.385),而 CD3+CD8+表達(30.233±0.258)高于正常 T細胞組(26.580±0.295),其 CD4+/CD8+比值(1.338±0.016)顯著低于正常
3、T細胞組(1.815±0.029),且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);SKOV-3細胞上清處理 T細胞組的Foxp3表達(10.260±0.782)明顯高于正常T細胞組(7.340±0.458),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
2、不同濃度白術內酯I誘導SKOV-3細胞上清處理T細胞組的CD4+/ CD8+比值,100umol/L(1.742±0.063)、50umol/L(1.434±0.032)、10umol/L(
4、1.358±0.018)均高于SKOV-3細胞上清處理T細胞組(1.338±0.016),且白術內酯I的濃度越高,比值越高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);不同濃度白術內酯I誘導SKOV-3細胞上清處理T細胞組的Foxp3表達,100umol/L(2.667±0.180)、50umol/L(3.547±0.309)、10umol/L(4.573±0.191)均低于SKOV-3細胞組(10.260±0.782),且白術內酯I的濃度越高,
5、Foxp3值越低;差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
3、LPS誘導SKOV-3細胞上清處理T細胞組的CD3+CD8+表達(33.573±0.828)高于 SKOV-3細胞上清處理 T細胞組(30.233±0.258),而 CD3+CD4+表達(29.740±0.675)低于SKOV-3細胞上清處理T細胞組(40.453±0.270),CD4+/ CD8+值(0.890±0.028)也明顯低于SKOV-3細胞上清處理T細胞組(
6、1.338±0.016),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);LPS誘導 SKOV-3細胞上清處理 T細胞組的 Foxp3值(10.807±0.430)高于SKOV-3細胞上清處理T細胞組(10.260±0.782),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:
1. MyD88+人卵巢癌SKOV-3細胞培養(yǎng)上清內,存在大量免疫抑制因子,其上清處理T細胞后,能夠抑制 CD3+CD4+T細胞表達,相對增加CD3+CD8+T
7、細胞表達,從而降低CD4+/CD8+比值,并促進Treg表達,使機體處于免疫抑制狀態(tài);而LPS可以促進其免疫抑制作用;
2.白術內酯 I可能通過阻斷 TLR4/MyD88通路,在一定濃度范圍內,以濃度依賴方式,下調MyD88+人卵巢癌SKOV-3細胞分泌的免疫抑制因子,從而促進T細胞亞群CD3+CD4+表達,增加其分布百分比,相對抑制CD3+CD8+表達,減少其分布百分比,從而升高CD4+/CD8+比值,激發(fā)機體免疫功能;抑制
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