大黃素對(duì)重癥急性胰腺炎SIRS大鼠腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的體外作用.pdf

1、背景：全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）是多種疾病發(fā)展至多器官功能不全綜合征（MODS）和多器官衰竭（MSOF）的前期表現(xiàn)，是許多疾病惡化的常見原因。重癥急性胰腺炎（SAP）是引起SIRS的重要疾病之一。中性粒細(xì)胞（PMN）是炎癥過程中的重要效應(yīng)細(xì)胞，在SIRS的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中起著關(guān)鍵作用。正常情況下PMN以凋亡的方式被巨噬細(xì)胞（Mφ）識(shí)別、吞噬和清除，凋亡的PMN若不能及時(shí)被巨噬細(xì)胞吞噬、清除，PMN自發(fā)崩解后釋放的毒性物質(zhì)，將會(huì)過度

2、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)及組織損害，形成惡性循環(huán)，從而加重SIRS。因此，凋亡的PMN適時(shí)、適度的清除就顯得格外重要。膜結(jié)合性CD14（mCD14）是巨噬細(xì)胞識(shí)別和吞噬凋亡中性粒細(xì)胞的主要受體之一。 目的：本實(shí)驗(yàn)通過制備大鼠重癥急性胰腺炎全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）模型，研究大黃素對(duì)重癥急性胰腺炎SIRS大鼠腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的體外作用。進(jìn)一步闡明腹腔巨噬細(xì)胞（PMφ）在急性胰腺炎SIRS中識(shí)別、吞噬凋亡PMN的意義，并為臨床藥物治療

3、提供理論依據(jù)。 方法：經(jīng)膽胰管逆行注入1．5%去氧膽酸鈉溶液制備大鼠SIRS的模型。動(dòng)物模型制備：20只SD大鼠隨機(jī)分為2組，即：假手術(shù)組、重癥急性胰腺炎SIRS模型組，每組10只。體外干預(yù)實(shí)驗(yàn)：將假手術(shù)組取出的腹腔巨噬細(xì)胞單獨(dú)設(shè)為1組；將重癥急性胰腺炎SIRS模型組取出的腹腔巨噬細(xì)胞分3組，即：大黃素干預(yù)組、地塞米松干預(yù)組、空白藥物對(duì)照組。大黃素干預(yù)組（干預(yù)終濃度為5ug/ml，乙醇的終濃度<0．1%）；地塞米松干預(yù)組（干預(yù)終

4、濃度為0．1 umol/ml），各干預(yù)組于巨噬細(xì)胞貼壁后（Mφ培養(yǎng)24h）給藥。造模24h后采取標(biāo)本做病理檢查和各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)。 光鏡下觀察各組胰腺標(biāo)本病理改變，進(jìn)行組織學(xué)評(píng)分；應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)各組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的表達(dá)；應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14表達(dá)。 結(jié)果： 1．各組大鼠光鏡下胰腺標(biāo)本病理改變：與假手術(shù)組比較，SIRS模型組具有顯著性病理改變。 2．各組大鼠pMφmCD14表

5、達(dá)的比較 （1）與假手術(shù)組比較：SIRS模型組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的表達(dá)明顯下降； （2）與SIRS模型組比較：大黃素干預(yù)組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的表達(dá)明顯升高；地塞米松干預(yù)組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的表達(dá)明顯升高。 （3）與地塞米松干預(yù)組比較：大黃素干預(yù)組腹腔巨噬細(xì)胞mCD14的表達(dá)明顯升高。 結(jié)論：較假手術(shù)組，SIRS模型組大鼠胰腺病理性改變程度較嚴(yán)重。重癥急性胰腺炎SIRS時(shí)，大鼠腹腔巨噬細(xì)胞mCD