氯膦酸二鈉脂質(zhì)體對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響.pdf

1、目的：重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)已嚴(yán)重危及人類的生命健康，其病程中常出現(xiàn)全身性炎癥反應(yīng)綜合征、嚴(yán)重感染、感染性休克及多器官功能障礙綜合征，導(dǎo)致死亡。隨著對(duì)其發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，巨噬細(xì)胞在SAP時(shí)抗原遞呈激活免疫反應(yīng)中起重要的作用。本研究旨在探討氯膦酸二鈉脂質(zhì)體的制備，同時(shí)觀察其對(duì)SAP大鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響。 方法：利用薄膜法制備氯膦酸二鈉脂質(zhì)體；經(jīng)大鼠胰腺被膜下均勻注射

2、牛磺膽酸鈉制作SAP模型，分離培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞，經(jīng)不同劑量的氯膦酸二鈉脂質(zhì)體(50、100、150μ L)作用，然后采用MTT法檢測(cè)氯膦酸二鈉脂質(zhì)體對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞增殖的影響，應(yīng)用中性紅比色法檢測(cè)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，通過(guò)檢測(cè)NO、O2-·和H2O2的含量來(lái)評(píng)估巨噬細(xì)胞的氧化應(yīng)激功能，采用Annexin V/PI雙標(biāo)記法和DNA瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測(cè)巨噬細(xì)胞的凋亡情況。 結(jié)果：所制備的脂質(zhì)體直徑100-200nm，clodron

3、ate包裹率為(5.8％)，透射電鏡檢查見其大小均勻。獲得的腹腔巨噬細(xì)胞形態(tài)正常，經(jīng)瑞氏染色法鑒定純度＞90％，臺(tái)盼藍(lán)染色，細(xì)胞存活率＞95％。在三種不同濃度氯膦酸二鈉脂質(zhì)體的干預(yù)下：MTT結(jié)果顯示巨噬細(xì)胞的生長(zhǎng)受到明顯抑制(P＜0.01)，抑制率隨藥物作用時(shí)間和劑量的增加而增加；巨噬細(xì)胞吞噬中性紅結(jié)果表明其吞噬功能受到明顯抑制，抑制率分別為17.4％，25.8％和38.0％；巨噬細(xì)胞分泌NO、O2-·的能力也受到明顯抑制，與對(duì)照組相比

4、差異具有顯著性(P＜0.05)；巨噬細(xì)胞產(chǎn)生H2O2的能力僅在100μL與150μL時(shí)受到明顯抑制(P＜0.05)；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在三種不同劑量氯膦酸二鈉脂質(zhì)體干預(yù)下，PM凋亡百分率分別為(10.32±0.34)％，(18.16±0.49)％和(29.87±0.35)％，差異均有顯著性(P＜0.01)；經(jīng)1.2％瓊脂糖凝膠電泳顯示，隨氯膦酸二鈉脂質(zhì)體濃度的增高出現(xiàn)漸清晰的特征性梯狀帶。 結(jié)論：利用薄膜法制備氯膦酸二鈉脂質(zhì)體