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文檔簡介
1、目的:觀察關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射HA對兔內(nèi)側(cè)半月板全部切除術(shù)后OA關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響。
方法:選取健康成年新西蘭大耳白兔30只,隨機(jī)分為三組:假手術(shù)組(A組)6只;HA實(shí)驗(yàn)組(B組)12只;模型組(C組)12只。除A組6只行雙膝關(guān)節(jié)囊切開外,其余24只(B組和C組)行右膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)半月板全部切除術(shù)制模,術(shù)后第4周開始,B組右膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射透明質(zhì)酸0.5 m L,A組和C組于相同時(shí)間相同方法注射
2、等量的生理鹽水,每周1次,連續(xù)5次。于末次給藥后兩周(術(shù)后11周),采用空氣栓塞法處死全部兔子,取股骨內(nèi)髁軟骨面標(biāo)本行大體和光鏡組織學(xué)觀察,原位細(xì)胞凋亡(TUNEL)技術(shù)檢測軟骨細(xì)胞凋亡,免疫組織化學(xué)和Western-blot手段檢測軟骨細(xì)胞iNO\蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)軟骨標(biāo)本大體觀察:A→C組軟骨標(biāo)本大體評分逐漸升高,B組軟骨標(biāo)本評分為(1.25±0.45),明顯低于C組評分(3.08±0.29),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
3、義(P<0.01)。(2)光鏡組織學(xué)觀察:C組可見關(guān)節(jié)軟骨表面纖維化,甚至形成糜爛、潰瘍,表層軟骨細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞數(shù)量明顯減少,中層細(xì)胞呈特征性簇狀排列,軟骨空陷窩數(shù)增多,軟骨空陷窩率為(22.75±2.70)%,B組軟骨表層略不平整,細(xì)胞排列欠規(guī)整,部分軟骨細(xì)胞簇聚成團(tuán),軟骨空陷窩率為(15.91±3.03)%,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(3)TUNEL_法測試細(xì)胞凋亡:A→C組凋亡指數(shù)逐漸升高,B組凋亡指數(shù)為(13
4、.42±2.57)%,低于C組(21.83±2.12)%(P<0.01)。(4)細(xì)胞iNOS蛋白表達(dá):A→C組iNOS免疫組化染色陽性率和Western-blot檢測的蛋白相對表達(dá)量逐漸升高,B組免疫組化陽性細(xì)胞率為(26.83±6.69)%,低于C組(41.83±4.17)%,Western-blot檢測B組iNOS蛋白相對表達(dá)量為(2.69±0.23),低于C組(3.60±0.18)%,兩者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。<
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