嗜酸乳桿菌靜息細胞轉(zhuǎn)化菜籽油生成共軛亞油酸的研究.pdf

1、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名(手寫癸豇簽字日期砂13年f月午日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解直

2、昌太堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)直墾太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)

3、位論文在解密后適用本授權(quán)書)靴敝儲讎汗寫塘毳簽字日期：糾多年(月葉日新瑚：餓礎(chǔ)簽字日期：20f多年6月鉀日摘要介質(zhì)濃度、pH、溫度、時間、細胞濃度6個因素進行研究，確定了最適轉(zhuǎn)化液介質(zhì)是01mol／L檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液，得到了最適pH、溫度、轉(zhuǎn)化時間和細胞濃度參數(shù)。同時，研究了不同金屬離子對進亞油酸異構(gòu)酶活性的影響，lmmol／LCa2和Cu2對亞油酸異構(gòu)酶活性有微弱促進作用，分別比對照組提高了O35％和062％。2mmol／LZn2

4、和cd對亞油酸異構(gòu)酶活性有較大促進作用，分別比對照組提高了240％和175％。在該基礎(chǔ)上，利用Box—Benhnken中心組合設(shè)計和響應(yīng)面法對轉(zhuǎn)化時間、pH、溫度、細胞濃度進行了工藝優(yōu)化分析，確定了最優(yōu)轉(zhuǎn)化時間25h，pH65，溫度36℃，細胞濃度40mg／ml。在此優(yōu)化條件下，CLA的產(chǎn)量可以達到23012士7521xg／ml。本項目研究了細胞不同透性化處理方法對CLA產(chǎn)量的影響，結(jié)果顯示，當(dāng)生物素的最適添加量為4mg／30ml時，C

5、LA產(chǎn)量達25625士32199／ml。生物素是嗜酸乳桿菌最適透性化處理方法，生物素不僅是一種良好的抗氧化劑，同時又可以增加細胞通透性，且簡單易操作。研究了將透性化的嗜酸乳桿菌細胞采用離心吸附法固定，以便該細胞態(tài)亞油酸異構(gòu)酶能多批次地用于CLA的合成，結(jié)果證實，該固定化細胞酶可連續(xù)轉(zhuǎn)化lO批次，產(chǎn)量保持在11599／ml以上。離心吸附固定化技術(shù)解決了包埋固定化方法存在物質(zhì)交換的障礙和操作繁瑣的難題，同時克服了吸附固定化方法吸附量小，細胞