基于對成纖維細胞調(diào)控探討益腎化瘀法治療盆腔炎性疾病后遺癥機制.pdf

1、目的:探討中醫(yī)學、西醫(yī)學對盆腔炎性疾病后遺癥的認識及益腎化瘀法治療盆腔炎性疾病后遺癥相關機制，明確益腎化瘀法對盆腔炎性疾病后遺癥過程中成纖維細胞增殖的干預機制及與益腎法、化瘀法機制差異。
　　方法:通過文獻研究，梳理盆腔炎性疾病后遺癥相關認識;通過益腎化瘀法改善盆腔炎性疾病后遺癥以及女性生育力的臨床研究，探討益腎化瘀方臨床療效。通過體外實驗，分別以不同濃度的YSHY、YS、HY方作用于體外培養(yǎng)的NIH/3T3細胞，以MTT法檢測細

2、胞增殖。觀察不同藥方對bFGF、TGF-β、HOP表達的影響。探討不同藥方對細胞外基質(zhì)表達的影響，如HA、Ⅲ型膠原蛋白等。探討對成纖維細胞Ⅲ型膠原蛋白mRNA表達的影響，觀察不同藥方對成纖維細胞STAT6信號轉(zhuǎn)導通路的影響。
　　結(jié)果:臨床研究發(fā)現(xiàn)益腎化瘀序貫組總有效率優(yōu)于對照組(P＜0.05)，軀體功能障礙、社會心理損傷等評分較對照組及中藥組下降，差異非常顯著(P＜0.01)。臨床研究還發(fā)現(xiàn)治療組、對照組患者治療后VAS評分均較

3、治療前降低，差異非常顯著(P＜0.01)，臨床妊娠率治療組顯著高于對照組(P＜0.05)。治療組消化系統(tǒng)和總的不良反應發(fā)生率低于對照組，差異顯著(P＜0.05)。
　　體外實驗發(fā)現(xiàn)益腎化瘀方能夠有效抑制成纖維細胞增殖及其相關細胞因子的表達，并減少HOP的產(chǎn)生，呈劑量依賴關系。而拆方組中的益腎方與益腎化瘀方相比，其抑制成纖維細胞增殖及相關機制的效應差異較低，差異顯著(P＜0.05);拆方組中的化瘀方與益腎化瘀方相比，其抑制成纖維細胞

4、增殖及相關機制的效應亦顯著較低，其差異也具有顯著性，（P＜0.05），但化瘀方比益腎方抑制成纖維細胞增殖的效應佳。HA表達量各干預組顯著下降。與空白組相比，各干預組均抑制HA表達，差異非常顯著(P＜0.01)，較之益腎化瘀組，益腎組及化瘀組抑制作用弱，差異非常顯著(P＜0.01)。各干預組Ⅲ型膠原蛋白表達顯著下降。與空白組相比，各干預組均非常顯著抑制HA表達(P＜0.01)，但較之益腎化瘀組，益腎組及化瘀組抑制作用弱，具有非常顯著差異(

5、P＜0.01)。采用比較2-△△Ct法分析細胞Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達量:即以管家基因β-actin作為內(nèi)參基因相對定量，以空白組細胞作為對照組，計算各組Ⅲ型膠原蛋白mRNA的△△Ct值。目的基因的量=2-△△Ct。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與空白組比較，干預各組Ⅲ型膠原蛋白mRNA表達有非常顯著降低趨勢(P＜0.01)，益腎化瘀組最低。α-SMA及STAT6的蛋白水平組間均存在顯著性差異。α-SMA蛋白:與正常組相比，益腎化瘀組、益腎組及化瘀組三組

6、該蛋白表達顯著下降(P＜0.01)，合方組與拆方組間兩兩比較，皆有顯著性差異(P＜0.01)。STAT6蛋白:與正常組相比，益腎化瘀組、益腎組及化瘀組三組該蛋白表達顯著下降(P＜0.01)，而合方組與拆方組間兩兩比較，皆有非常顯著差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:益腎化瘀法具有顯著抑制盆腔炎性疾病后遺癥過程中成纖維細胞增殖的效應，其機制是通過抑制成纖維細胞增殖相關細胞因子的表達及抑制細胞外基質(zhì)相關膠原蛋白的表達實現(xiàn)的。與益腎法、化