可溶性CD22作為B細(xì)胞活化標(biāo)志物的臨床意義及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分 sCD22在腎移植排斥反應(yīng)患者血漿中的表達(dá)水平及臨床意義
　　目的：可溶性CD22（sCD22）是斷裂的CD22分子胞外段，目前免疫相關(guān)疾病中關(guān)于sCD22的研究甚少。我們推測(cè)，B細(xì)胞活化導(dǎo)致CD22轉(zhuǎn)化為“暴露態(tài)”可能是sCD22產(chǎn)生的機(jī)制，sCD22可能是 B細(xì)胞活化的血清標(biāo)志物；因此，移植排斥反應(yīng)中血清sCD22水平很可能升高。為了研究sCD22與移植排斥反應(yīng)的相關(guān)性，我們嘗試了在腎移植受者的血清中檢測(cè)sCD22。

2、
　　方法：我們采集了32例腎移植受者和15例健康志愿者的血清標(biāo)本，將受試者分為三組：排斥組、功能穩(wěn)定組和對(duì)照組。利用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），我們檢測(cè)血清sCD22濃度，并分析其與臨床資料的相關(guān)性。
　　結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)，發(fā)生排斥反應(yīng)的腎移植受者相較于腎功能穩(wěn)定受者和健康人群具有更高的 sCD22水平，sCD22>2.5ng/ml對(duì)于腎移植排斥反應(yīng)具有一定的診斷意義（敏感性54.17％，特異性73.91%）。但是，sCD

3、22對(duì)于腎移植排斥反應(yīng)的診斷敏感性較低，僅能對(duì)部分排斥反應(yīng)作出診斷，而一小部分腎功能穩(wěn)定受者的sCD22水平也呈輕度升高狀態(tài)。
　　結(jié)論：我們?cè)诒緦?shí)驗(yàn)中首次研究了腎移植受者血清 sCD22的表達(dá)水平，初步證實(shí)了sCD22與移植排斥反應(yīng)具有相關(guān)性，并有一定的診斷價(jià)值。為揭示sCD22這一新的炎癥因子的臨床意義和應(yīng)用價(jià)值提供了新的研究方向，同時(shí)也為研究移植排斥反應(yīng)提供了一個(gè)新的標(biāo)志物。
　　第二部分sCD22在膿毒癥患者血清中的

4、表達(dá)水平及臨床意義
　　目的：我們推測(cè)sCD22是B細(xì)胞活化的血清標(biāo)志物，其在膿毒癥患者血清中的表達(dá)水平可能升高。為了分析sCD22與膿毒癥的相關(guān)性，并探討其診斷意義，我們嘗試在膿毒癥患者血清中檢測(cè)sCD22水平。
　　方法：我們共采集血清樣本104例，其中嚴(yán)重膿毒癥患者14例，膿毒癥患者24例，局限性感染患者25例，非感染性SIRS患者26例，健康志愿者15例。利用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），我們分別檢測(cè)了血清sCD22

5、、降鈣素原（procalcitonin，PCT）和白介素6（interleukin-6，IL-6）濃度，分析其與臨床資料的相關(guān)性，并比較這三種因子對(duì)膿毒癥的診斷意義。
　　結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)sCD22的血清濃度與革蘭氏陰性細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度具有明顯的相關(guān)性，膿毒癥患者的血清sCD22濃度高于非感染性SIRS和局限性感染患者，非感染性SIRS和局限性感染患者sCD22水平也高于健康人群，尤其在嚴(yán)重膿毒癥患者，其血清sCD22水平更高。s

6、CD22能夠有效鑒別感染患者和非感染患者、全身性感染患者和局限性感染患者、以及膿毒癥和非感染性SIRS患者，其診斷效力與PCT和IL-6相當(dāng)。另外，sCD22與APACHE II評(píng)分的相關(guān)性高于PCT和IL-6。
　　結(jié)論：sCD22是一種非特異性炎癥因子，對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌性膿毒癥具有診斷意義，其診斷價(jià)值與PCT和IL-6相當(dāng)，并且sCD22在預(yù)后評(píng)估方面可能比PCT和IL-6具有更高的應(yīng)用價(jià)值。
　　第三部分sCD22與B

7、細(xì)胞活化相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：分別在體內(nèi)和體外研究sCD22與B細(xì)胞活化以及B細(xì)胞表面CD22“暴露態(tài)”的相關(guān)性，探討sCD22產(chǎn)生的機(jī)制，以及sCD22表達(dá)水平在B細(xì)胞活化相關(guān)疾病中的變化規(guī)律。
　　方法：①體外實(shí)驗(yàn)：分別通過(guò)LPS刺激活化和唾液酸酶（sialidase）消化預(yù)處理，使B細(xì)胞表面CD22分子轉(zhuǎn)化為暴露態(tài)，并通過(guò)ELISA法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中sCD22的濃度變化，并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析B細(xì)胞表

8、面CD22的表達(dá)變化；②動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：分別通過(guò)腹腔注射LPS和盲腸結(jié)扎穿刺的方法構(gòu)建小鼠膿毒癥模型，檢測(cè)血清sCD22水平和B細(xì)胞表面CD22的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：在體外實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)唾液酸酶預(yù)處理B細(xì)胞能夠在12小時(shí)內(nèi)導(dǎo)致sCD22水平輕度升高，但不能維持sCD22的持續(xù)上升；而LPS刺激能夠在24小時(shí)以后導(dǎo)致sCD22水平的持續(xù)性升高，并于大約72小時(shí)達(dá)到高峰。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，CLP膿毒癥小鼠和LPS膿毒癥小鼠血清sCD22水平均